标本稀释对凝血的影响研究论文

【摘要】 目的 比较病人用EDTA抗凝血和枸橼酸钠抗凝血检测PT、INR结果的差异。方法 120位受试对象用枸橼酸钠和EDTA抗凝各采两管血，分离血浆后在STAGO仪器上检测PT，对两种抗凝方式所得PT、INR结果进行线性回归分析，分析其相关性及其结果间有无显著性差异。结果 以枸橼酸钠法测得PT为y，EDTA法测得PT为x，两者间PT线性方程为y=，R2=，PT结果相关性好，但差异有显著性。INR线性方程为y=，R2=，相关性好且差异无显著性。讨论 EDTA抗凝血浆检测PT在临床上是可接受的，但前提条件是应建立自己的参考区间，报告INR结果时还应统计EDTA抗凝血的MNPT（正常人平均PT），根据公式INR=（PT/MNPT）ISI计算INR值。 【关键词】 EDTA; 凝血酶原时间现阶段进行凝血项目检测都是用枸橼酸钠抗凝，抽取血液量与枸橼酸钠的比例是9：1，在真空采血管中包含固定量的 ml抗凝剂，真空采血管内的负压保证了从血管中吸出 ml血液。但是在实际情况中偶尔会发生血液量不足的问题，比例发生改变会影响凝血结果[1]。使用EDTA抗凝管可能会解决这个问题，因为EDTA粉末在抗凝过程中几乎不对血液造成稀释，也就不会发生稀释比例的改变。本文研究在于诠释用EDTA抗凝时所测得的PT、INR结果与枸橼酸钠抗凝时的相关性。 1 材料和方法 仪器和试剂 Stago 公司生产的STA型全自动凝血分析仪，使用Stago 公司配套试剂，配套质控品。Dade-Behring公司生产的INR校准血浆； 标本来源 收集本院健康体检者标本60例，男30例，女30例，年龄20～53岁；收集本院心胸外科心脏瓣膜置换术后及其它原因致PT延长病人标本60例，男35例，女25例，年龄21～55岁。 实验方法 枸橼酸钠抗凝血MNPT的计算 同一仪器使用不同生产厂家、不同批号的凝血活酶试剂所计算出的正常人平均PT（MNPT）值是不一样的，故我们应重测所用凝血活酶试剂匹配的仪器MNPT值，而不应使用生产厂家给我们提供的MNPT值[2]。计算MNPT需要至少20份正常血浆。本实验我们挑选60名健康体检者，经过仪器测试PT值，剔除>2S的数据, 经统计学处理，计算得出枸橼酸钠抗凝血的MNPT值。 EDTA抗凝血MNPT的计算 60名健康体检者的EDTA抗凝血，测试PT结果后，剔除>2S的数据, 经统计学处理，计算得出EDTA抗凝血的MNPT值。 Local ISI(仪器区域国际敏感指数)的建立 仪器不可使用试剂说明书上附带的ISI值，因为此ISI值是试剂制造商用手工方法所测出的，并非是实验室仪器对所用批号凝血活酶试剂的Local ISI[3]，所以要重新建立Local ISI。用已标注INR值的校准血浆复溶后，在Stago仪器上测PT 2～3次，得出PT秒数均值，INR=（PT/MNPT）Local ISI，将枸橼酸钠及EDTA抗凝血各自的MNPT结果及已知的INR结果代入上式，即可求出Local ISI=lgINR/(lgPT－lgMNPT)，故能分别求出两种抗凝方式各自的Local ISI。 PT、INR的检测 本院健康体检者标本60例，本院心胸外科心脏瓣膜置换术后及其它原因致PT延长病人标本60例用枸橼酸钠和EDTA抗凝管各抽一管血，3 500 r/min离心5 min,以制备乏血小板血浆，在4 h内完成检测。根据公式INR=（PT/MNPT）Local ISI，得到INR值。 统计学方法 对枸橼酸钠和EDTA抗凝所得的各120份标本的PT、INR结果进行线性回归统计，分析其相关性，并用配对t检验分析两者间是否存在显著性差异。 2 结 果 MNPT结果 橼酸钠抗凝血MNPT为 s，EDTA抗凝血MNPT为 s。 Local ISI结果 橼酸钠抗凝血Local ISI为，EDTA抗凝血Local ISI为。 枸橼酸钠抗凝血的PT结果为y，EDTA抗凝血的PT结果为x，结果见表1。经线性回归统计，两者间PT线性方程为y=，R2=, PT结果相关性好，经配对t检验，t=<, 差异有显著性。 枸橼酸钠抗凝血的INR结果为y，EDTA抗凝血的INR结果为x，结果见表1。经线性回归统计，两者间INR线性方程为y=，R2=, INR结果相关性好，经配对t检验，t=，P=>，差异无显著性。表1 枸橼酸钠与EDTA抗凝血的PT、INR检测结果 3 讨 论 研究发现PT、INR结果间是有相关性的，在临床上使用EDTA抗凝管检测PT是可行的。但同时也发现，PT结果间差异有显著性，两种抗凝方式下PT的生物参考区间是不同的，所以要建立EDTA抗凝下PT的参考区间。INR结果间差异无显著性，因为我们重新计算了EDTA抗凝下的MNPT，从上述结果可见，EDTA抗凝下的MNPT比枸橼酸钠抗凝下MNPT要长，通过PT/MNPT在一定程度上消减了EDTA抗凝下PT的延长，INR结果有良好的相关性。因此我们可以报告INR结果或者通过公式换算PT结果y=。 PT结果间的差异主要是因为标本的稀释不同造成的，因为枸橼酸钠抗凝管中存在 ml抗凝剂，血液：抗凝剂=9：1，而EDTA管中抗凝剂是固体粉末，加入血液后几乎不对血液稀释，因而抽取血液量的多少十分关键，这也是分析前质量控制的一个环节。 使用EDTA抗凝血的优势在于抗凝管可与血液学分析使用同一管血液，血样进行完血液学分析后可分离血浆，用于凝血项目检测，便于检验科仪器自动化的建立。使用一管血液不仅节省抗凝管，而且病人没有必要抽取更多管血液，也便于医疗废弃物的处理，不会因为血量的多少造成稀释不同而影响结果。 本文使用经过计算的EDTA抗凝下的Local ISI，与枸橼酸钠抗凝下的Local ISI是不一样的，因为现阶段没有EDTA抗凝下的INR定值血浆存在，以后若有INR定值血浆来校准ISI会使得EDTA抗凝的使用更方便，更有市场。【参考文献】 [1] 徐爱丽,毛庆民,张乐研.标本采集量对PT、APTT检测结果的影响[J].临床军医杂志,2007,35(6):913.[2] 倪赞明，徐明光，王晓明，等.凝血酶原时间ISI/INR系统测定中的一些问题及改进意见[J]检验医学,2006,21(5):492�495.[3] 许蕾,王学锋,李泳，等.血浆凝血酶原时间测定中建立仪器区域国际敏感指数的实验控讨[J]检验医学,2004,19(5):441�443.

标本溶血对检验结果的影响及其处理方法

检验工作中，影响临床结果准确性的有很多因素，其中以溶血最常见，了解标本溶血对部分检验结果的影响及溶血后的处理方法，可以更好地进行检验工作，并提高检验结果的准确性和可信性。下面是我为大家带来的关于标本溶血对检验结果的影响及其处理方法的知识，欢迎阅读。

溶血对不同检测项目结果的干扰机制不同，主要包括：

1.细胞内外成分浓度差的干扰，当标本溶血时，细胞内含量高的物质顺浓度差溢出，使测定结果明显偏高，如ALT、AST、LDH、K+、CK等。

2.溶血时，血细胞中浓度低的物质稀释血浆标本，使测定结果偏低，如ALP、GGT等。

3.细胞内、外液成分之间存在干扰。

4.有色物质对某些项目化学反应前后颜色变化的吸收光谱产生干扰，如血红蛋白干扰对TP、TBIL等的测定，由于血红蛋白的颜色影响原实验最佳波长的选择。

5.溶血还可造成乙型肝炎病毒表面抗原假阳性的检测结果。

标本溶血是指在采集、运送、分离和保存血液的过程中，由于各种原因，尤其是操作不当引起的红细胞在体外破裂，红细胞的破裂会造成大量的细胞内物质进入血浆以及血清稀释等系列变化，而造成的'溶血现象。

造成标本溶血的因素有：

1.真空采血管负压太大，血液进入采血管后由于血细胞之间的激烈碰撞，导致细胞破裂发生溶血。

2.因为试管质量不过关，真空采血管在制造过程中，试管内壁处理不好导致血细胞挂壁而造成血细胞破裂导致溶血。

3.采血不规范造成标本溶血，如：操作者采血时将止血带扎得太紧，时间过长，采血时负压过大，红细胞受外力而溶血;采血时定位进针不准针尖在静脉中探来探去，造成血肿和血样溶血;静脉穿刺处用乙醇消毒，乙醇未干即开始采血也会发生溶血;

为提高检验结果的准确度，应采取相应处理方法：

1.应掌握采集血液标本的正确方法：

①临床采血多选用肘正中静脉，避免选择过细的静脉，遇到采血困难的患者，扎止血带的时间不可过长，亦不要反复拍打穿刺部位，以防机械刺激造成溶血。

②采血时要选择好穿刺，常规消毒待消毒液干燥后，找准血管，争取一针见血。

③血液采集后应尽早离心使血浆分离出来，血液放置时间不宜过长。

④妥善保存标本：标本送到检验科后，应放在温室下保存，以防止发生溶血。在血液标本的运输过程中，防止过度振荡而发生溶血。

2.一旦发现溶血标本，主动与临床联系，结合临床首先排除体内溶血的可能，在条件允许的情况下，应重新采集标本，否则应在检验报告单上注明溶血程度，以提醒临床医生注意。

3.从方法学上克服或减少溶血的干扰，如通过设置样品空白或改用双波长比色。