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病毒名称:柑橘速衰病毒Citrustristezavirus(CTV)。
分类地位:长线形病毒属Closterovirus,长线形病毒科Closteroviridae。在国际病毒分类委员会(ICTV)中的编码为。
病毒异名:Citrusquickdeclinevirus、Hassakudwarfvirus、Limedie-backvirus。
病毒提纯:用病叶的汁液,经过差速离心,梯度离心,获得病毒的线状粒子,用硫酸铯密度离心法获得纯化的CTV核蛋白。也可以从酸柠檬病株幼苗剥下的树皮抽提液中获得大量的病毒。具体方法:用研钵研碎经液氮冷冻的病组织,加入缓冲液(),每克组织加入,4000r/min,离心10min,然后8000r/min,离心5min,每100ml上清液加4gPEG(分子质量6000u)和4ml20%的氯化钠,16000r/min,离心15min,沉淀悬浮于磷酸缓冲液中(),5000r/min,离心10min,再经29000r/min,离心90min,沉淀再悬浮于水中,5000r/min,离心10min,即可得病毒的纯化制剂。
病毒理化特性:
①病毒粒子。长线形,弯曲,大小为2000nm*11nm。140±10S。A260/A280:
②核酸。单链RNA,单基因组,分子质量*106u(Bar-Joseph等,1989)。
③蛋白。有两组分,CP1分子质量为23000u,CP2为21000u。氨基酸组成为CP1;lys17;his4;arg8;asp22;thr12;ser16;glu13;pro5;gly24;ala16;cys1;val13;met1;ile8;leu20;tyr4;phe4(Leeetal.,1988)。
株系:根据致病力的不同分为很多株系。
柑橘黄苗株系:引起柠檬、酸橙、葡萄柚和香橼的幼苗严重黄化和矮缩。
葡萄柚凹茎株系:在澳洲、南非、南美、远东,感染葡萄柚病树矮化和丛簇,叶疏松,小而圆,脉间褪绿,树干和大分枝的木质部纵向有针孔凹斑,主干分枝歪斜、畸形,果实小、畸形和果皮变厚,严重减产。
酸柠檬枯梢株系:在幼嫩叶片上引起叶脉斑点,大小分枝的木质部有严重的针孔斑,树形矮化、枯梢,逐渐死亡。
此外,还报道有得克隆柑橘速衰病毒的轻型和烈性毒株、墨西哥报道的一种柑橘Citrushassaku速衰病毒的轻型株系和南非、委内瑞拉的分离物等。
其他:柑橘衰退病一般为无症感染,嫁接在酸橙上,出现枝枯、落叶、矮化甚至死亡。这是由于病毒使筛管坏死,根部无法吸收营养所致。受害处髓射线细胞木质化,并出现凹陷斑、针刺孔等症状。这些症状不是速衰病所特有的,由Spiroplasmacitri引起的僵化病也能产生相似的症状(EPPO/CABI,1992b)。有些感病品种(主要是酸橙、葡萄柚和甜橙),即使将它们嫁接在耐速衰病的砧木上,CTV侵害后也能产生茎陷斑、矮化和减产。被害症状和受害程度取决于病毒株系,强毒株系能使一些品种产生茎陷斑。果树被害后,果实小、果质差。
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病毒名称:柑橘皱叶病毒Citrusleafrugosevirus(CiLRV)。
分类地位:等轴不稳环斑病毒属Ilarvirus,雀麦花叶病毒科Bromoviridae。在国际病毒分类委员会(ICTV)中的编码为。
病毒异名:柑橘皱叶病毒(Citruscrinklyleafvirus)。
病毒提纯:病株组织在6倍体积冷冻过的()磷酸缓冲液(含5%蔗糖,巯基乙醇酸)匀浆5min后,加入10%正丁醇-氯仿(1∶1),搅动30min后在40℃下10000r/min,离心15min。再将上清液在40℃下110000r/min高速离心90min,然后将沉淀用()的磷酸缓冲液进行悬浮。最后通过多次差速离心进一步纯化。
病毒理化特性:
①病毒粒子。多面体、球状,直径26~32nm,分别约为(NP1)、(NP2)、(NP3)和(NP4)。(Gonsalves&Garnsey,1976)。沉降系数分别为105S(NP1)、98S(NP2)、89S(NP3)、79S(NP4)。等电点和。
②核酸。单链RNA,四组分,分子质量分别为*106(RNA1),*106(RNA2),*106(RNA3),*106(RNA4)。
③蛋白。单一组分,分子质量26ku。
其他:柑橘杂色病毒同苹果花叶病毒有许多特性相似,但从生物学和血清学都易区别开。柑橘杂色病毒在Mexican柠檬上不产生粗缩症,而本病毒在枸橼上不引起严重扭曲和杂色纹,在菜豆和豇豆上局部坏死症,而柑橘杂色病毒都引起系统症。两病毒的核蛋白组分的纵剖面图也不同:本病毒的NP4组分多,NP1和NP2少。两病毒的核酸种类也有差异。同样,本病毒同图拉苹果花叶病毒在生物和物化特性方面也有同上类似的差别。图拉苹果花叶病毒在黄瓜上为局部褪绿斑,千日红脉带,烟草局部坏死和休克症,而本病毒不侵染。图拉苹果花叶病毒不稳定,其核蛋白组分的沉淀图也与本病毒的不同。
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