Brita阿菜
尿素的测定方法可分为两大类：一类直接法，尿素直接和某试剂作用，测定其产物，最常见的为二乙酰一肟法；另一类是尿素酶法，用尿 素酶将尿素变成氨，然后用不同的方法测定氨。 1)尿素酶法（直接法）：尿素酶法利用尿素酶催化尿素水解生成铵盐，铵盐可用纳氏试剂直接显色、酚-次氯酸盐显色或酶偶联反 应显色。尿素测定目前多采用尿素酶偶联法：用尿素酶分解尿素产生氨，氨在谷氨酸脱氢酶的作用下使NADH氧化为NAD+时，通过34 0nm吸光度的降低值可计算出尿素含量。此反应是目前自动生化分析仪上常用的测定原理。此外，尿素酶水解尿素产生氨的速率，也可用电导的方法进行测定，其电导的增加 与氨离子浓度有关，反应只需要很短的时间，适用于自动分析仪。2）酚-次氯酸盐显色法：尿素酶水解尿素生成氨和酚及次氯酸盐，在碱性环境中作用形成对-醌氯亚胺，亚硝基铁氰化钠催化此反 应：对-醌氯亚胺同另一分子的酚作用，形成吲哚酚，它在碱性溶液中产生蓝色的解离型吲哚酚：此反应敏感，血清用量少（10μl），无需蛋白沉淀，一般用于手工操作测定中。3)纳氏试剂显色法：尿素经尿素酶作用后生成氨，氨可与纳氏试剂（HgI2.2KI的强碱溶液）作用，生成棕黄色的碘化双汞铵。尿素酶法的优点是反应专一，特异性强，不受尿素类似物的影响，缺点是操作费时，且受体液中氨的影响。⑵二乙酰一肟法（直接法）：尿素可与二乙酰作用，在强酸加热的条件下，生成粉红色的二嗪化合物（Fearom反应），在54 0nm比色，其颜色强度与尿素含量成正比。二乙酰不稳定，用二乙酰一肟代替，后者遇酸水解成二乙酰。 试剂中加入Fe3+或Cd2+及硫氨脲，可提高灵敏度，增加显色稳定性，其中Fe3+和Cd2+有氧化作用，还能消除羟胺的 干扰作用。提高酸的浓度可增加灵敏度。二乙酰一肟与尿素的反应不是专一的，与瓜氨酸也有显色。本法灵敏、简单，产生的颜色稳定， 缺点是加热时有异味释放，一般临床已很少使用此方法。尿素测定用血清或血浆，体液中尿素的浓度常用尿素中含有的氮来表示，称为尿素氮。如欲换算成尿素，可根据60g 尿素含有28g氮计算，即1g尿素相当于0.467g尿素氮，或是1g尿素氮相当于2.14g尿素。正常参考值：血清尿素氮为2.8-7.1mmol/L，相当于尿素1.8-6.8mmol/L。
小牛芸芸*
尿素的测定方法可分为两大类：一类直接法,尿素直接和某试剂作用,测定其产物,最常见的为二乙酰一肟法；另一类是尿素酶法,用尿 素酶将尿素变成氨,然后用不同的方法测定氨. 1)尿素酶法（直接法）：尿素酶法利用尿素酶催化尿素水解生成铵盐,铵盐可用纳氏试剂直接显色、酚-次氯酸盐显色或酶偶联反 应显色.尿素测定目前多采用尿素酶偶联法：用尿素酶分解尿素产生氨,氨在谷氨酸脱氢酶的作用下使NADH氧化为NAD+时,通过34 0nm吸光度的降低值可计算出尿素含量.此反应是目前自动生化分析仪上常用的测定原理.此外,尿素酶水解尿素产生氨的速率,也可用电导的方法进行测定,其电导的增加 与氨离子浓度有关,反应只需要很短的时间,适用于自动分析仪.2）酚-次氯酸盐显色法：尿素酶水解尿素生成氨和酚及次氯酸盐,在碱性环境中作用形成对-醌氯亚胺,亚硝基铁氰化钠催化此反 应：对-醌氯亚胺同另一分子的酚作用,形成吲哚酚,它在碱性溶液中产生蓝色的解离型吲哚酚：此反应敏感,血清用量少（10μl）,无需蛋白沉淀,一般用于手工操作测定中.3)纳氏试剂显色法：尿素经尿素酶作用后生成氨,氨可与纳氏试剂（HgI2.2KI的强碱溶液）作用,生成棕黄色的碘化双汞铵.尿素酶法的优点是反应专一,特异性强,不受尿素类似物的影响,缺点是操作费时,且受体液中氨的影响.⑵二乙酰一肟法（直接法）：尿素可与二乙酰作用,在强酸加热的条件下,生成粉红色的二嗪化合物（Fearom反应）,在54 0nm比色,其颜色强度与尿素含量成正比.二乙酰不稳定,用二乙酰一肟代替,后者遇酸水解成二乙酰. 试剂中加入Fe3+或Cd2+及硫氨脲,可提高灵敏度,增加显色稳定性,其中Fe3+和Cd2+有氧化作用,还能消除羟胺的 干扰作用.提高酸的浓度可增加灵敏度.二乙酰一肟与尿素的反应不是专一的,与瓜氨酸也有显色.本法灵敏、简单,产生的颜色稳定, 缺点是加热时有异味释放,一般临床已很少使用此方法.尿素测定用血清或血浆,体液中尿素的浓度常用尿素中含有的氮来表示,称为尿素氮.如欲换算成尿素,可根据60g 尿素含有28g氮计算,即1g尿素相当于0.467g尿素氮,或是1g尿素氮相当于2.14g尿素.正常参考值：血清尿素氮为2.8-7.1mmol/L,相当于尿素1.8-6.8mmol/L.
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