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鬼谷子研究论文集

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鬼谷子研究论文集

鬼谷子的著作:《鬼谷子》、《本经阴符七术》。

1、《鬼谷子》,战国著名道家,纵横家鼻祖“鬼谷子”王诩的著作。《鬼谷子》作为纵横家游说经验的总结,它融会了鬼谷子毕生学术研究的精华,其价值是不言自明的。该书作为纵横家的代表著作,为后世了解纵横家与道家的思想提供了不少的参考。

2、《本经阴符七术》说明如何充实意志,涵养精神。后四篇讨论如何将内在的精神运用于外,如何以内在的心神去处理外在的事物。

鬼谷子,著名谋略家、道家代表人物、兵法集大成者、纵横家的鼻祖,精通百家学问, 因隐居云梦山鬼谷,故自称鬼谷先生。鬼谷子常入山修炼,深谙道法,神妙莫测。

“王禅老祖”是后人对鬼谷子的称呼,为老学五派之一。老学:苏张(苏秦和张仪) 、 鬼谷一派,申、 韩一派; 杨朱一派,庄、 列一派,尹文一派。

他通天彻地,智慧卓绝,人不能及。一曰数学,日星象纬,在其掌中,占往察来,言无不验;二曰兵学,六韬三略,变化无穷,布阵行兵,鬼神不测;三曰言学,广记多闻,明理审势,出词吐辩,万口莫当;四曰出世,修真养性,祛病延年,服食导引,平地飞升。

二千多年来,兵法家尊他为圣人,纵横家尊他为始祖,算命占卜的尊他为祖师爷,谋略家尊他为谋圣,名家尊他为师祖,道教尊其为王禅老祖。 在文化史上,他是与孔子、孟子、庄子、荀子、墨子、韩非子等先哲齐名的学术大家。

参考资料来源:百度百科-王诩

鬼谷子一书 和《本经阴符七术》 苏秦与张仪 另有孙膑与庞涓亦为其弟子 在鬼谷子的五百弟子中,最有名气的是苏秦、张仪、孙膑、庞涓、商鞅,剩下的毛遂、徐福、甘茂、司马错、乐毅、范雎、蔡泽、邹忌、郦食其、蒯通、黄石、李牧、魏僚等一个个都是很厉害的人物,奈何没有确切而权威的文献记载,是以其真实性有待考证。

鬼谷子的著作是《鬼谷子》和《关令尹喜内传》。

《鬼谷子》最早见于《隋书·经籍志》,在其后的史书及其他文献典籍也多有记载。《鬼谷子》作为纵横家游说经验的总结,它融会了鬼谷子毕生学术研究的精华,其价值是不言自明的。《鬼谷子》共二十一篇,其中的转丸,却已失传。该书作为纵横家的代表著作,为后世了解纵横家的思想提供了不少的参考。

《鬼谷子》一书,一直为中国古代军事家、政治家和外交家所研究,现又成为当代商家的必备之书。它所揭示的智谋权术的各类表现形式,被广泛运用于内政,外交、战争、经贸及公关等领域,其思想深受世人尊敬,享誉海内外。

《关令尹喜内传》,始著录于《隋书·经籍志》史部,署名鬼谷先生撰。《旧唐书·艺文志》亦著录。唐代王悬河的《三洞珠囊》引录有《文始先生无上真人关令内传》,并注为“鬼谷先生撰”。

文中着重宣传了道家的理论原则,即尊崇自然、清静无争、不炫耀和斋戒、中食。阐发了贪心短寿、心诚得道、作恶受罚的道理,主张以“道”来普度众生,反映了 道家的理论和观点。

据传,我国战国时代纵横家的鼻祖鬼谷子为楚国人,姓名传说不一,曾经在鬼谷隐居,因以鬼谷子自号,人们也这样称呼他。

第一种说法否认鬼谷子其人的存在。乐一在注《史记·苏秦列传》时说:“苏秦欲神秘其道,故假名鬼谷子。”他认为鬼谷子就是苏秦。清朝人翁元圻在注《国学纪闻》时说法更为明确:“秦仪,即鬼谷子。”有人认为鬼谷子是对隐士的泛称,唐朝人李善注《文选》说:“鬼谷之名,隐者也,通号也。”既然认为鬼谷子只是泛称隐者,实际上也就是否认鬼谷实有其人。现在学术界也有人认为鬼谷子非历史人物。

1984年,湖北人民出版社出版的《湖北历史人物辞典》列了很有名的慎子、鹖冠子,但未列鬼谷子。《古今伪书考补证》讲到鬼谷子时说:“史记所记,得之传闻,本不足据。”又说:“其人无考,况其书乎?”《宗教辞典》也称其是“中国古代传说人物”。

第二种说法认为鬼谷子是神。据《仙传拾遗》记载,鬼谷子“疑神守一,朴而不露,在人间数百岁,后不知所之”。杜光庭《录异记》也认为:“鬼谷先生者,古之真仙也……自轩辕之代,历于商周,随老君西化流沙周末复还中国。”

第三种说法对鬼谷子的有无半信半疑。清朝人秦恩复以为“或云周时豪士,隐于鬼谷者,近是”(四部备要本《鬼谷子》)。所谓“近是”即接近正确,并没有完全肯定。现在也有学者认为“欲证鬼谷子真有其人,终不可得其确”,同时认为“鬼谷其人,又不全虚”(《古籍整理论文集·鬼谷子研究》)。新版《辞海》、《辞源》在介绍鬼谷子时,前面都冠以“相传”二字以示不作确切肯定。

第四种说法认为鬼谷子是战国时楚国人。现在介绍鬼谷子的文字不系统,不完整,也不可靠,但根据大量见于古籍中的资料,历史上确有鬼谷子其人。

《史记》最早记载鬼谷子,司马迁与鬼谷子生活的年代相隔较近,根据苏秦、张仪谢世的年纪推测,最多也就一两百年,因此司马迁所记应当是比较可靠的。《史记》虽无鬼谷子传记,但是在《苏秦列传》中太史公记曰:“苏秦者,东周雒阳人也,东事师于齐,而习之于鬼谷先生。”在《张仪列传》中也说张仪是鬼谷子的学生。另外,司马迁在《史记·太史公自序》中有一段引文:“故曰,圣人不朽,时变是,虚者道之常也,因者君之纲也。”司马迁未注明出处,但是唐朝人司马贞在《索引》中指出:“此出《鬼谷子》,迁引之以成其章,故称‘故曰’也。”可见司马迁与司马贞都曾见到过鬼谷子的著作。

许多鬼谷先生遗迹尚在湖北当阳鬼谷洞附近。据《舆地纪胜》记载,此洞“即鬼谷子隐处”。今鬼谷洞外石壁上嵌有3块石碑,均系清光绪五年重修大仙洞的石碑记,其中有一段曰:“清溪寺山后五里许,有大仙洞,系战国时鬼谷大仙披门仙师修真之所……残碑隐隐有字迹,(鬼谷庙)大约始于晋。”在鬼谷洞东南2千米处有棋盘山,亦名云梦山,据《当阳县志》称“传鬼谷子对弈处”。

综上所述,历史上究竟有无鬼谷子其人尚无定论,要揭开谜底,还需要充足的证据和深入的研究。

鬼谷子权谋研究论文800字

游说的谋略鬼谷子·权篇第九:本篇讲的是游说的谋略,鬼谷子先生认为:说话稳健的人,透出果敢和勇气;言语充满忧虑的人,会权衡利弊而令人信任;说话雍容镇静的人,辩论反而能取胜。“善用天下者,必量天下之权”。鬼谷子先生指出:“与聪明人说话,要依于博大精深;与渊博的人说话,要依于逻辑思辩;与逻辑思维能力强的人说话,要依于简明扼要;与高贵者说话,要依于宏大的气势;与富人说话,要依于高雅;与穷人说话,要依于利益;与地位低下的人说话,要依于谦虚;与勇敢的人说话,要依于果敢;与有过失的人说话,要依于进取。”这是鬼谷子的九大说话原则,它们至今仍闪烁着光辉。鬼谷子的弟子张仪,见什么人说什么话,巧于言语,古今闻名。望采纳

就兵法而言,孙子兵法是武兵法,而鬼谷子是文兵法;就权谋而言,鬼谷子讲求顺应人心,把握趋势,万事万物谋划于无形之中,让人看不出真相,所以称之为权谋

遇事不轻举妄动,耳朵听事在于聪明,头脑思考在于明辨,说辞辩词在于出其不意

全是手段,各种厚黑,直接用吧

关于鬼谷子的论文文献

是一个隐居在鬼谷的一个居士,他写了很多的著作,而且这些著作都是有历史依据的同时也给人们很大的启示,经历了很多的事情,也是春秋战国时期的人。

战国时期的鬼谷子是真实存在的,他是一个研究说话艺术的隐姓埋名的学者。汉朝的很多资料都证明了这个人物的存在。在史记中有的《苏秦列传》中有过记载,苏秦者,东周洛阳人也,东事师于齐而习之于鬼谷先生,而在史记《张仪列传》中又有提到,张仪者,魏人也时常与苏秦俱事鬼谷先生,西汉的扬雄,东汉的王充都说过,鬼谷子是苏秦、张仪的老师。既然苏秦、张仪是历史上真实存在的人物,那么他们的老师也应该在历史上真实存在过。鬼谷子相传是生活在战国时期的楚国中,鬼谷子是有着一个神秘中又透露着深不可测的魅力,关于鬼谷子的出身民间流传非常之多。虽然在史书中没有发现一些直接记录来证明鬼谷子是真实存在的一个人物,可是在相关的文献里我们都可以找到鬼谷子非常多的事迹。鬼谷子的重要学说就是纵横之术,在这里也可以摸索到关于鬼谷子的一些事迹,据司马迁在在在《史书》中的记载,汉武帝时期大臣主父偃曾学纵横术,并曾此术是开山祖师乃鬼谷先生也。这就说明了在当时的汉代人们对纵横之术的理解也来自鬼谷子。在南朝的陶弘景,唐代的李善等都有在各自的著作里提到过鬼谷子的存在。通过对各种关于鬼谷子论述的总结分析,大致可以得出鬼谷子确实是生活在战国时代,是一位行踪不定的理论家,实践者。可以从素秦和张仪的生活年代大致推算出鬼谷子的生活年代。鬼谷子的一生给我们带来最重要的影响就是其纵横之术和其下鼎鼎大名的两个高徒,所以鬼谷子肯定不只是存在民间的传说里,他肯定是一个把自己的智慧传递个别人的凡人。

是真实存在的,依据就是秦始皇想让他成为自己的谋士。他也出山了,并且给了秦始皇很多的计谋。

鬼谷子应该是在春秋末战国时期初,因为在史记中有记载,东事师于齐,而习之于鬼谷先生 ,而且苏秦张仪都是拜在了鬼谷子的门下,师出同门,由此推算,他应该是魏人。

吸血鬼研究论文

事实的真相好像是一个精神病人,因为精神不正常而去咬一个小女孩儿,其实并不是吸血鬼。

请问你是哪里人,如果你是北京的,我建议你去首都图书馆,在4层有好多关于 吸血鬼 研究方面的书,都是文学研究类的,不是小说。我就看过两本,写的都很全面。其中一本叫《吸血鬼全书》(这是这本书的封面)淘宝上或卓越亚马逊书城上应该能买的到,还有一本叫《吸血鬼传奇》(这本书的封面)。还有一本书也是研究这个的,忘了叫什么名字了,你可以去当地的图书馆看看,应该有研究这类文学的书。希望能帮到你。你选的论文题目很特别,我大学毕业的时候也想选这个题目的,可惜我不是外国语学院或中文系的。

事实真相如何从来都无从考证,因为都是传闻,官方都没有给出真相,谣言罢了

该隐 吸血鬼族始 最强大的 第三代与他最接近 因不满上帝对亚伯的宠爱 所以杀了亚伯 因此受到上帝的惩罚 从此沦为血族你可以去百度一下圣经 然后根据该隐 往下编。

谷子毕业论文

自考本科的考生需要撰写毕业论文,自考专科的考生则不用。自考本科毕业后的一个关卡,自然不是随便一篇文章就可以糊弄的,尤其是想要拿到学位证的考生,论文的质量和水平更为重要。下面给考生们整理了一些关于写自考毕业论文的方法,希望能帮助到大家!1、了解写作要求这个是基本的了,每个学校的要求都可能不太一样。毕业论文是由学校审核的,规则也是由学校制定的。在写作之前一定要了解学校给出的写作要求和提示,不可大意!有些考生的毕业论文没有通过的原因都是根据自己的想法去写,没有参考学校给出的要求。2、拟定提纲拟定提纲有助于考生梳理逻辑,让论文更有条理,思绪清晰,构造出毕业论文的框架,在这个环节考生需要列举出来的是题目、基本论点和内容纲要。3、构思主题一篇文章一定会有一个主导思想和写作思路。在写作之前需要花很多心思去思考去选择。一个适合的主题,就相当于完成了论文的1/3.因此,在动笔写之前,一定要清楚自己想要写什么。考生需注意的是:开头的部分一定要简明清晰,引人入胜,通过历史回顾和现状分析指明论文的重点,也可以适当的介绍自己的论证方法,中间部分通过选材时找到的资料论证观点,要注意把握文章内容的层次、大小段落间的内在联系。4、条理清晰,用词准确没有条理。有的考生不能按照提出问题、分析问题、总结问题的大体思路去写,整个论文看上去没有条理,不知所云。选材陈旧。有的毕业论文,用过去陈旧的事例,看上去是老面孔、老腔调,摆出的材料是“陈年烂谷子”,没有新鲜感和现实性,文章就显得没有说服力。用词不准确。有的考生文字表达能力比较差,同时又不注意修改,用词很不准确。比如把“罄竹难书”当成褒义词来用。还有的则自造一些词语,表达起来让人不知其真实含义,如“深深多许”之类。5、坚持就是胜利撰写毕业论文的过程中,每一位考生都会遇到难题,会产生心烦、没有耐心甚至不想继续写的想法。这时考生们需要自行调节情绪,这对能不能写出一篇好的论文影响很大。参考文献的搜索网站推荐以下几种:中国知网:维普:万方::读秀:

知识改变命运,学历成就人生,即使参加工作了,提升学历也是非常有必要的,职场看能力也看学历,没有一个好的学历,很难在求职或者晋升中走得顺利,还有可能错过一些非常难得的机会。提升学历也是件很重要的事情,那么如何攻克自考论文难关?

如何攻克自考论文难关?

说起毕业,相信大家首先想到的是论文啊、答辩啊。而现在应该正是毕业生们忙着写论文的时期,而怎样写出符合毕业要求的论文呢?怎么让自己的论文避免低级错误呢?教务老师收集了一些建议,希望能让毕业生们在写论文的时候少走弯路。

不少自考生的本科毕业论文常常不符合要求。论文中有明显的“硬伤”痕迹。

一是材料与所论证的主题脱节。

材料一定要围绕主题,为表现和论证主题服务。但有些考生感到自己所找的材料非常好,以为很生动,不愿意去掉。结果将一些与主题无关的材料也写进文章里,影响主题的表达。比如写“忠义思想”这个主题时,把“孟母三迁”是感动人的,但它与主题无关,所以应当去掉。

二是论据失真。

有些考生选材不准,或不去鉴别真伪,拿来就用,结果人名、事件、时间、地点、数字等都出现错误。比如“不想当元帅的士兵不是好士兵”这句名言,有考生居然写成希特勒所说。

三是没有条理。

有的考生不能按照提出问题、分析问题、总结问题的大体思路去写,整个论文看上去没有条理,不知所云。

四选材陈旧。

有的毕业论文,用过去陈旧的事例,看上去是老面孔、老腔调,摆出的材料是“陈年烂谷子”,没有新鲜感和现实性,文章就显得没有说服力。如有篇关于老工业基地改革的文章,引用的数字都是上世纪的,既没有新鲜感,有没有说服力。

五是用词不准确。

有的考生文字表达能力比较差,同时又不注意修改,一用词很不准确。比如把“罄竹难书”当成褒义词来用。还有的则自造一些词语,表达起来让人不知其真实含义,如“深深多许”之类。

六是乱用标点。

有的考生文中乱用标点,错别字很多。这些错误反映考生的文字功底不扎实。作为本科生不应该出现这些最基本的错误。

自考论文的意义?

论文是自考本科毕业的最后一个关卡,自然不是随便一篇文章就可以糊弄的,尤其是想要拿到学位证的考生,论文的质量和水平更为重要。

1、在毕业论文撰写过程中,导师扮演着很重要的角色。越接近定稿的阶段,与导师的沟通也该更为频繁。在此过程中,考生要遵从导师意见,及时修改论文。“论文指导教师大多经验丰富。遇到拿不准的问题,考生要及时向导师请教,不要自作聪明,以免耽误答辩。从论文的格式、引用的规范到句式逻辑以至于字体,都可以按导师意见修改。

2、指导考生论文答辩的导师一般都有参与论文答辩的经验。听从导师的意见,与导师多沟通,写出来的论文一般都会符合答辩教师的“口味”。如果不做准备就拿着自己的初稿去参加答辩,且不说论文能否通过,恐怕连导师的问题也答不上来。而在和导师沟通修改论文的

过程中,自己对论题有了更深的了解,从而使论文逻辑更清晰,回答答辩教师问题时也能有的放松自如。

3、考生参加论文答辩,不是要照本宣科地把自己的论文读一遍,而是根据自己的论文进行简练的阐述,这就需要考生在答辩时将自己的论文凝练为一篇论文简介。有些专业还要求考生将论文简介做成ppt形式。无论形式如何,考生对论文的阐述都要做到简练、准确、规范。

自考毕业论文是专升本临门最后一脚,在这个环节可不能出一丝差错。那么,考生们在准备论文的时候最容易犯哪些错误呢?1、材料与所论证的主题脱节材料一定要围绕主题,为表现和论证主题服务。但有些考生感到自己所找的材料非常好,以为很生动,不愿意去掉。结果将一些与主题无关的材料也写进文章里,影响主题的表达。比如一篇文章是论述会计制度的,结果却重点讲了很多企业制度的问题。2、论据失真。考生写论文很多是在网上找资料,但是网上的良莠不齐,这就需要考生自己鉴别每一条材料的真假,不要出现时间、地名、人名等的错误,更加不要张冠李戴。3、缺乏条理有的考生不能按照提出问题、分析问题、总结问题的大体思路去写,整个论文看上去没有条理,不知所云。4、选材陈旧有的毕业论文,用过去陈旧的事例,看上去是老面孔、老腔调,摆出的材料是“陈年烂谷子”,没有新鲜感和现实性,文章就显得没有说服力。如有篇关于老工业基地改革的文章,引用的数字都是上世纪的,既没有新鲜感,有没有说服力。5、用词不准确有的考生文字表达能力比较差,同时又不注意修改,一用词很不准确。比如把“七月流火”当成形容天气很热的成语来用,看了令人啼笑皆非。6、乱用标点有的考生文中乱用标点,错别字很多。这些错误反映考生的文字功底不扎实。作为本科生不应该出现这些最基本的错误。

收稿日期:2007-10-25基金项目:深圳市科技和信息局基金资助项目作者简介:王丹(1982-),女,辽宁本溪人,硕士研究生,从事植物生物技术研究。注:雷江丽为通讯作者。大花美人蕉茎尖组织培养技术研究王 丹1,2,雷江丽2,吴燕民3,吕 慧2,郁继华1(1.甘肃农业大学 农学院,甘肃 兰州 730070;2.深圳市园林科学研究所,广东 深圳 518003;3.中国农业科学院 生物技术研究所,北京 100081)摘 要:以大花美人蕉(Canna×generalis)根茎茎尖为外植体进行组织培养技术研究,筛选出芽诱导适宜的培养基为MS + 6-BA (单位下同)+ TDZ ;MS + 6-BA + TDZ + NAA 培养基能较好地诱导分化出丛生芽, 继代增殖培养中与MS + 6-BA + TDZ + NAA 培养基交替使用可减少畸形芽,增殖系数达;适宜的生根培养基为MS + 6-BA + NAA ,生根率达,且植株生长健壮,移栽易成活。关键词:大花美人蕉;茎尖;组织培养中图分类号: 文献标识码:A 文章编号:1009-7791(2008)01-0033-04Research on Shoot-tip Culture of Canna×generalisWANG Dan1,2, LEI Jiang-li2, WU Yan-min3, LÜ Hui2, YU Ji-hua1( of Agronomy, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070, Gansu China; Institute of LandscapeGardening, Shenzhen 518003, Guangdong China; Research Institute, Chinese Academy of AgriculturalSciences, Beijing 100081, China)Abstract: The paper mainly studied on tissue culture of Canna×generalis with the stem tips asexplants. The results showed that the bud inoculation medium was MS + 6-BA ; the best of clump shoot induction and differentiation medium was MS + 6-BA +TDZ + NAA ; using MS + 6-BA + TDZ + NAA asproliferation medium, an optimal proliferation rate was obtained. When the two kinds of mediumused alternatively, the effect was better. The optimum rooting medium was MS + 6-BA +NAA , the rate of rooting could reach , and cultured in this medium, the plant grewwell and easy to words: Canna×generalis; shoot-tip; tissue culture大花美人蕉(Canna×generalis)属美人蕉科(Cannaceae)美人蕉属(Canna)的园艺杂交种[1],是多年生喜光宿根草本花卉,原产美洲热带和非洲等地。其枝叶茂盛、花朵艳丽、姿态优美、花期长,在深圳地区几乎全年开花,是配置大型花坛的优良品种。大花美人蕉不仅观赏价值高,而且能吸收硫、氯、氟、汞等有害物质,具有净化空气、保护环境的作用,因此,世界许多城市的园林绿化中都广泛应用。美人蕉传统的繁殖方式主要采用分切地下根茎的方法,繁殖速度慢、增殖效率低,而且连续营养繁殖造成病毒积累致使病毒病在各地相当普遍,严重影响其观赏价值。利用茎尖组织培养进行脱毒试管苗快繁,是目前大力繁殖与推广美人蕉的主要手段。关于美人蕉组织培养的研究报道较少[2,3],本研究探索其组织培养高效的再生体系,以期为品种提纯复壮及遗传转化、性状改良奠定基础。2008,37(1): Plant Science第·34· 37 卷1 材料与方法 材料供试材料为目前城市绿化中普遍应用的大花美人蕉‘President’品种。 外植体选择与处理选择生长健壮、无病虫害的优良母株,挖取带芽胞的根茎,去除表面老皮并用肥皂水清洗。用75%乙醇棉擦拭,然后采用不同的消毒剂及处理时间(升汞10min、2%次氯酸钠10min、2%次氯酸钠20min、2%次氯酸钠 + 升汞5min、2%次氯酸钠 + 升汞10min),封闭式振摇灭菌。无菌水冲洗5 次,置于超净工作台上备用。接种前,剥去外部叶片,露出生长点,立即切取茎尖进行接种。 培养方法及培养条件试验于2006 年10 月在深圳市园林科学研究所组培室进行。诱导、增殖和生根培养基均选用MS为基本培养基,在不同培养阶段附加不同种类、不同浓度配比的植物生长调节剂(表2~表4),蔗糖3%,pH 。培养温度(28±2)℃,光照强度2 500 lx,光照周期为14h/d,相对湿度70%~80%。每处理接种30 瓶。定期观察试管苗生长与分化情况。2 结果与分析 不同消毒处理方式对外植体无菌化的影响因供试外植体取自美人蕉地下根茎,表面污染物较多,不易消毒,且不同植物及外植体的成熟度对消毒剂的反应不同,故本试验选用升汞和次氯酸钠进行灭菌效果比较,以筛选合适的消毒剂及消毒处理时间。由表1 可知,2%次氯酸钠20min 处理的无菌化效果较好,但茎尖褐化较严重,说明灭菌时间过长对去老皮后的幼嫩根茎影响较大。升汞10min 处理与2%次氯酸钠 + 升汞 10min处理,无菌化效果差异不大,但2%次氯酸钠 + 升汞 10min 处理有轻微药害。因此,后续实验选用升汞处理10min 进行外植体消毒。 不同生长调节剂配比对芽诱导的影响以MS 为基本培养基,附加不同浓度6-BA、NAA、2,4-D、KT、TDZ 等(表2),以筛选出较适宜美人蕉茎尖诱导分化的配方。因美人蕉根茎具有休眠特性,芽诱导分化较难。TDZ 具有很强的促进细胞分裂活性,~μmol/L 即可有效促进分化[4],因此,本实验对TDZ 的诱导效果进行初步探索。试验表明,在不添加任何生长调节剂的MS 基本培养基(1 号)上,茎尖接种10d 后开始生长,叶片展开后,生长停止;15d 后转接到新的MS 培养基上无明显生长,随后叶片逐渐变黄、萎蔫,说明基本培养基中添加生长调节剂是美人蕉离体培养的必要条件。在仅添加6-BA 的2、3、4 号培养基中,高浓度的2 号培养基分化率为,明显好于3、4号培养基,说明美人蕉启动芽诱导分化需要高浓度的细胞分裂素(表2)。11~16 号培养基添加物为不同生长调节剂与TDZ 组合(表2)。仅添加TDZ 的培养基分化率为0,而多种生长调节剂配合使用分化效果更好[5]。其中15 号培养基的侧芽分化率最高,达,且每个茎尖可增殖2~3 个侧芽,但个别茎尖经多次转接后有畸形芽;与2 号培养基相比,分化率明显提高,说明添加低浓度TDZ 可促进芽诱导分化(表2)(图版-a)。5、6、7 号培养基为生根培养基,探讨NAA 对美人蕉茎尖生长和生根的影响。试验结果初步说明美人蕉在6-BA/NAA 小于2/ 时生根率可达50%以上(表2)。8、9、10 号培养基,探讨美人蕉脱分化,诱导愈伤组织,但结果均不理想。因此,建立高效的美表1 不同消毒剂及处理时间对外植体无菌化的影响处 理 接种数污染数污染率(%) 药害情况升汞10min 30 5 基本无药害2%次氯酸钠10min 30 12 无药害2%次氯酸钠20min 30 4 20%有轻微药害2%次氯酸钠+升汞5min 30 10 3%有轻微药害2%次氯酸钠+升汞10min 30 5 7%有药害第1 期 王丹,等:大花美人蕉茎尖组织培养技术研究 ·35·人蕉遗传转化再生体系还需进一步探索愈伤组织诱导途径。 芽继代增殖为了探讨优化的芽继代增殖培养基配方,按表3 设计6-BA、NAA、TDZ 的正交实验,以15 号培养基上分化出的丛生芽为接种材料,进行继代增殖培养(图版-b)。由表3 可见,除17、18 号培养基外,低浓度TDZ()的分化促进作用较高浓度()的效果好,说明高活性的TDZ 浓度过高反而抑制分化。当 时, NAA 促分化作用显著优于。在TDZ、NAA 浓度相同的情况下,随着6-BA 浓度的升高,分化率提高。但随着继代次数的增多,含高浓度6-BA的27 号培养基分化率略有下降,甚至有个别畸形芽产生,说明高浓度细胞分裂素对短期的分化有促进作用[9],但继代数次后,芽已经萌动,自身具有分化能力,需适当降低6-BA 浓度进行壮苗,以避免畸形芽产生。因此,在增殖过程中交替使用分化增殖系数较高的19 号培养基和27 号培养基,既可保证较高的芽分化率,又可使继代苗生长健壮,减少畸形芽。 生根诱导增殖芽3~5cm 长时,转接到生根培养基上培养约10d 后,可见到根生成(图版-c)。接种20d 后统计生根结果(表4)。从表4可见,所用培养基上都有根生成,说明美人蕉生根较容易;结合生根率和生长势,我们认为MS + 6-BA + NAA 培养基较适宜美人蕉生根。表2 不同植物生长调节剂组合的比较植物生长调节剂(mg/L) 编号6-BA NAA 2,4-D KT TDZ分化率(%) 生根率(%) 备注1 0 0 0 0 02 9 0 0 0 0 参考[2]3 5 0 0 0 0 参考[3]4 3 0 0 0 0 2 1 0 0 0 2 0 0 0 2 0 0 0 08 0 0 4 0 09 0 0 2 1 0 参考[6]10 0 0 2 0 参考[7]11 0 0 0 0 012 0 0 0 参考[8]13 0 0 0 0 0 1 0 8 0 0 0 5 0 0 表3 不同生长调节剂配比对芽继代繁殖的影响生长调节剂(mg/L) 编号6-BA NAA TDZ接种数分化率(%)增值系数 生长势17 30 ++18 30 ++19 30 ++20 30 ++21 30 ++22 30 ++23 30 ++24 30 +25 30 ++26 30 +27 30 ++28 30 +注:++ 表示生长势强;+表示生长势弱。同列中不同字母表示差异显著(P<=,表4 同。表4 不同的生长调节剂配比对组培苗生根的影响生长调节剂(mg/L) 编号6-BA NAA接种数生根苗数生根率(%)植株生长势29 0 30 19 +30 0 30 21 ++31 30 20 +++32 30 16 ++注:+++ 表示生长势强;++表示生长势中等;+表示生长势弱。第·36· 37 卷3 结 论美人蕉根茎生长在土壤中,无菌化操作较困难。灭菌试验表明,升汞震荡灭菌10min 效果较好,采回的外植体应尽快处理接种,放置时间过长伤口处易染菌,导致接种后褐化较严重。MS + 6-BA + ZDT + NAA 培养基能较好地诱导分化丛生芽,MS + 6-BA + TDZ NAA 为较好的增殖培养基,在增殖培养过程中这两种配方交替使用效果更好;短时间使用高浓度生长调节剂对增殖有促进作用,但长时间使用高浓度生长调节剂会使组培苗质量下降。在试验中还发现,转接次数多的茎尖较转接次数少的分化率大,建议在接种后的10~20d 内及时转接。选用MS + 6-BA + NAA 为生根培养基,生根率较高,根系粗壮、根毛密集,植株生长健壮(图版-d),且移栽成活率较高。参考文献:[1] Segeren W, et al. 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