青蒿素的检测方法论文

青蒿为菊科艾属植物黄花蒿artemisiaannual.的地上部分，青蒿素是青蒿中提取的用于治疗疟疾的主要成分。青蒿素是我国唯一获得国际承认的抗疟新药，青蒿素类药物治疗恶性疟疾效果显著，成为世界卫生组织推荐的抗疟药品，青蒿素类药品不仅对治疗疟疾效果显著，在抗肿瘤、治疗艾滋病、黑热病红斑狼疮等相关疾病方面也取得了进展。目前，2015版中国药典对青蒿的质量控制尚存在不足，缺少其主要药效成分青蒿素的含量测定，这不利于青蒿药材的质量控制和高品质青蒿药材的培育。虽然近年来也有关于青蒿素含量测定的方法，包括紫外分光光度法、薄层色谱法，以及能进一步精确定量的高效液相色谱法，如中国专利公开号为cn103353498a、名为一种测定青蒿素浸膏中青蒿素含量的高效液相色谱方法，但从该专利的色谱图可以看出，青蒿素的色谱峰与其它杂质峰之间的分离度低、基线偏移严重，在定量的准确性上仍有待进一步提高。因此，为了更好地对青蒿药材实现质量控制，以及为高品质青蒿药材的培育进行质量把关，有必要开发一种青蒿中青蒿素的含量测定方法。技术实现要素：本发明的发明目的在于：针对目前缺少能够准确测定青蒿药材中青蒿素含量的方法的问题，提供一种青蒿中青蒿素的含量测定方法。本发明有效去除了石油醚提取液中的大部分杂质，避免了供试品溶液中杂质过多对色谱系统造成的污染和堵塞，并且供试品溶液色谱图基线平稳，青蒿素峰附近无杂质峰干扰，本发明的加标回收率实验结果表明所用的供试品溶液制备方法能有效地将青蒿素从青蒿干叶中提取出来，重复性实验结果表明供试品溶液制备方法可重复性高、稳定性高，上述实验结果也表明了液相色谱条件的准确性和可靠性。为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：一种青蒿中青蒿素的含量测定方法，包括以下步骤：a.供试品溶液的制备：取青蒿干叶打成细粉，然后精密称取细粉置于圆底烧瓶中，加入石油醚提取两次，过滤，收集两次提取的滤液，合并滤液，然后加入石油醚定容，接着静置2小时以上，得提取液，之后将提取液加入硅胶层析柱中进行上样，吸附形成三条色带，采用石油醚和乙酸乙酯的混合溶液作为洗脱液进行洗脱，收集中间色带的洗脱液作为主成分溶液，再精密吸取主成分溶液体积的1/20-1/10于65-70℃蒸干得残渣，接着加入主成分溶液体积1/20-1/10的醇溶剂溶解残渣并定容，然后超声处理1-3分钟，再冷藏小时以上，最后吸取上清液用微孔滤膜过滤，收集续滤液，得供试品溶液；b.对照品溶液的制备：精密称取青蒿对照品，按料液比为1:1000-2000g/ml加入醇溶剂进行溶解，得对照品溶液；c.样品测定：将对照品溶液和供试品溶液分别注入高效液相色谱中，以峰面积外标法计算青蒿素的含量。优化的，步骤a中所述细粉与第一次提取加入的石油醚的料液比为1:15-25g/ml，所述细粉与

一,青蒿素的发现屠呦呦发现青蒿素(Artemisinin),一种治疗疟疾的药物,在全球特别是发展中国家挽救了数百万人的生命,获得2011年度拉斯克-狄贝基临床医学研究奖。引起人们对参与青蒿素研制人员的关注,特别是周维善院士等人全合成青蒿素,得到媒体大量报道。1970年代初,屠呦呦从植物中提取了青蒿素。1979年上海生物物理所确定了蒿素青的绝对空间构型。1977年报道了青蒿素结构。[青蒿素结构研究协作组.一种新型的倍半萜内酯青蒿素.科学通报,1977,(3):142.] 1979年12月以英文公开报道青蒿素抗疟作用。[Qinghaosu Antimalarial Coordinatiing Research Group, Antimalarial studies on qinghaosu. Chinese Medicine Journal, 1979, 92(12):811-816.](It remained largely unknown to the rest of the world for about seven years, until results were published in the Chinese Medical Journal in report was met with skepticism at first, partly because the chemical structure of artemisinin, particularly the peroxide, appeared to be too unstable to be a viable drug.)    二,青蒿素的合成全合成,新发现的化合物由已知化合物一步一步的人工合成的过程。半合成,新发现的化合物由另一个未知化合物一步一步的人工合成的过程。全合成在有机合成史中非常重要,几百年来创造许多经典的合成方法及技术等。奎宁作为治疗疟疾的药物已有几百年的历史,是青蒿素的前一代药物,从树皮中提取.大约在1850-2000年之间,有机化学家们不断地全合成奎宁化合物,涌现许多杰出的科学家,开创一个又一个研究领域.[1],1983年1月,Schmid G, Hofheinz W.发表青蒿素全合成论文.[Schmid G, Hofheinz W. Total synthesis of Qinghaosu. J Am Chem Soc, 1983, 105(3):624～625].反应示意图见上面.以(-)-2-异薄荷醇((-)-Isopulegol)为原料,巧妙的设计,最后得到青蒿素.反应物(11)>>反应物(12)>>青蒿素是最后两步关键反应,其他研究者都参照该步骤.[2],1983年6月,许杏祥,朱杰,黄大中,周维善发表了青蒿素半合成的论文.[许杏样,朱杰,黄大中,周维善.青蒿素及其一类物构造和合成的研讨. X. 从青蒿酸立体操纵合成青蒿素和脱氧青蒿素. 化学学报,1983,41(6):574-575].系列论文研究之一,参考论文[1],大约经过5步反应,最后两步借用论文[1],没有独创性.由已知开始物一步一步合成到最后的未知物,这篇论文却把最后5步先合成了,而且关键的两步还是借用论文[1],有疑团丛丛之感!!(《化学学报》 1983年06期,中文摘要)(化学学报(Acta Chim. Sinica),英文摘要)[3],1984年5月许杏祥等报道以香草醛为原料合成双氢青蒿酸甲酯.[许杏祥,朱杰,黄大中,周维善.青蒿素及其一类物结构和合成的研究 XVII.双氢青蒿酸甲酯的立体控制性合成-青蒿素全合成,化学学报,1984,V42(9): 940-942].结合论文[2],构成青蒿素的全合成.但至今为止,没被研究者引用过,不知什么原因,无法重复?既然是全合成,为什么不直说哪?玩弄文字游戏? [4],论文[3]英文版[《Acta Chimica Sinica(English Edition)》 1984年02期,Studies on structures and syntheses of arteannuin and its related compounds——ⅩⅦ.The stereocontrolled total synthesis of methyl dihydroarteannuate—T