苜蓿种子研究论文前言

苜蓿以"牧草之王"著称，不仅产量高，而且草质优良，各种畜禽均喜食。我国目前苜蓿的种植而积约133万hm2。随着商品经济的发展，近年来苜蓿产业化规模发展较快，苜蓿的种植而积正在扩大。为了更科学地种植苜蓿，提高苜蓿产品的质量和产量，现将苜蓿耕作与栽培管理技术要点介绍如下。 一、耕作技术 (一)选地 苜蓿适应性广，可以在各种地形、土壤中生长。但最适宜的条件是土质松软的沙质壤土，pH值为，冬季温度-20℃左右，年降水量在300-800mm，不宜种植在低洼及易积水的地里。轻度盐碱地上可以种植，但当土壤中盐分超过时要采取压盐措施。为了便于机械化运输及操作管理，尽量选择交通便利、大面积连片具有排灌措施的地块。 (二)整地 苜蓿种子小，苗期生长慢，易受杂草的危害，播前一定要精细整地。整地时间最好在夏季，深翻、深耙一次，将杂草翻入深层。秋播前如杂草多，还要再深翻一-次或旋耕一次，然后耙平，达到播种要求。 苜蓿有根瘤，能为根部提供氮素营养，一般地力条件下不提倡施氮肥。据有关研究表明，苜蓿施磷肥后增产效果比较明显，且一次施足底肥和以后分期施肥效果基本一样。播前结合整地施有机肥2-3m2/亩、纯磷8-16kg/亩一次施人。由于苜蓿生长过程中茎叶带走大量的钾，有条件的地方可适当施些钾肥以维持高产，为了防止苗期杂草的发生，播前将48%的氟乐灵(100m1/亩)喷入土中，结合整地旋入5cm土中，有效期可达3-5个月。 二、播种 (一)选种 选择适宜的良种是种好苜蓿成功的第一步。因为苜蓿是多年生植物，一次播种后，少则利用2-3年，多则利用4-5年，一旦选错，几年受损。目前国内品种表现较好的有保定苜蓿、甘农l号杂花苜蓿、新疆大叶苜蓿、敖汉苜蓿、中苜l号耐盐苜蓿等。国外引进的比较好的有美国的皇后、WL323、WL320、安斯塔、百绿及日本的立若叶和北若叶苜蓿。国外引进的品种直立性好，利于机械化收割。 （二)种子处理 国内生产的种子有的杂质较多，品质不能保证，所以一定要清选，使净度90%以上、发 芽率85%以上，纯度98%以上才行。播前种子最好进行丸衣化处理。按种子500kg+包衣材料150kg+粘合剂水75kg+钼酸铵的配方进行，使种子在苗期不受病虫害、杂草等的危害，才能健壮生长。 (三)播种时间 北方一年两熟地区，一般采用秋播。土壤水分充足，温度适宜，杂草和病虫害较少。在陕西、河北、山西、山东、天津、北京地区，以秋播最好，播种期为8月10日至9月10日。太晚影响正常越冬。 (四)播种方法及播种量 大部分地区以条播为主，行距30cm，利于通风透光及田间管理。播种量一般为lkg/亩左右，采种田要少些，盐碱地可适当多些，播量过大苗细弱。播种深度是影响出苗好坏的关键，一般是播种过深，最佳深度为—1cm。 三、田间管理 (一)除草 清除杂草是苜蓿田间管理的一项主要内容，一-是在幼苗期，另一则是在夏季收割后，由于这两个时期苜蓿生长势较弱，受杂草危害较为严重，特别是夏季收割后，水热同步杂草生长快，不论采取什么方法，一定要做到及时规范。选择除草剂要慎重，以免造成牲畜中毒。 （二)灌水与排水 苜蓿耗水量大，每生产lkg干物质需水800L。在冬前、返青后、干旱时要浇水。滨海、低注地要注意雨季排水，水淹24h苜蓿会死亡。 （三）病虫存防治 苜蓿生育期间遇到病虫害时一定要及时防治，否则会影响产量和品质。一般用杀螟 松、乐果、氰戊菊酯等喷雾，防治害虫、如发生锈病、褐斑病、霜霉病，用多菌灵、托布津等药剂防治。 四、收割 （一)收割时期 一般在始花期，也就是开花达到1/10时开始收割，最晚不能超过盛花期。 (二)收割次数及留茬高度 苜蓿为多年生植物，再生性强，每年可收割3-4次，最后一次收割不要太晚，否则影响养分积累，不利于安全越冬。一般收割后要留出40-50天 的生长期。留茬高度以5cm为宜。

人工种子(artificial seed) 是人为制造的种子，它是一种含有植物胚状体或芽、营养成分、激素以及其他成分的人工胶囊。植物组织培养可以诱导植物组织产生胚状体，这种结构与来自正常有性生殖的合子胚十分相似。将胚状体包裹在含有营养成分和保护功能的膜内，就可以做成人工种子，在适宜条件下，这种人工种子与天然种子一样，可以发芽出苗。人工种子是在植物的快速繁殖技术上发展起来的，它的主要优点是：繁殖速度很快，可以用发酵罐大量生产，生产成本比试管苗低，且体积小，易于运输等。人工种子的前景十分诱人。 ------------------------------------------------ 人工种子（artificial seeds，synthetic seeds）的概念最早是由Murashige(1978)提出的，是指通过组织培养技术，将植物的体细胞诱导成在形态上和生理上均与合子胚相似的体细胞胚，然后将它包埋于有一定营养成分和保护功能的介质中，组成便于播种的类似种子的单位。人工种子首先应该具备一个发育良好的体细胞胚（即具有能够发育成完整植株能力的胚）；为了使胚能够存在并发芽，需要有人工胚乳，内含胚状体健康发芽时所需的营养成分、防病虫物质、植物激素；还需要能起保护作用以保护水分不致丧失和防止外部物理冲击的人工种皮。通过人工的方法把以上3个部分组装起来，便创造出一种与天然种子相类似的结构——人工种子。 由于人工种子是通过无性繁殖产生的，与天然种子相较，人工种子可以工厂化生产和贮存；可以减少具有杂种一代优势的作物的育种程序；可以快速繁殖结实率低或难以用种子繁殖、育性欠佳的作物；可以快速推广优良种质资源；人工种子还具有节约种源、土地，不受季节限制的优点。因此，受到许多国家的重视，我国已将人工种子的研究列入了863高新技术发展计划。Kitto等（1981）用聚氧乙烯包裹胡萝卜胚状体首次制成了人工种子。经过20余年的研究，人工种子的研究取得了很大进展，除了胡萝卜、苜蓿、芹菜、水稻、玉米、甘薯、棉花、西洋参、小麦、烟草、大麦、油菜、百合、莴苣、马铃薯等农作物种子外，花卉和林木人工种子如长寿花、水塔花、白云杉、黄连、刺五加、橡胶树、柑桔、云杉、檀香、黑云杉、桑树、杨树等都有成功生产的报道。 1. 人工种子的制备方法与技术要求 人工种子制备包括胚状体的诱导与同步化、人工种子的包埋、人工胚乳的制作、人工种皮的制作、人工种子贮藏等步骤内容。 胚状体的诱导与同步化 生产高质量的胚状体是制作人工种子的关键。从目前的研究结果来看，并不是所有的植物种子都开发出了胚状体培养发生技术。不同植物的体细胞的培养亦有难易。在生产人工种子时，要求胚状体具有可观的成株率，甚至超过天然种子。 胚状体的诱导：胚状体可从悬浮培养的单细胞得到，也可通过试管培养的愈伤组织、花粉或胚囊获得。胚状体一般在培养物的表面产生，其形状与合子胚类似，但胚状体却是无性繁殖的产物。实际操作中，一般在试管中诱导出愈伤组织，并在含生长素的培养液中悬浮培养，然后置于含生长素的发酵罐中，使细胞迅速扩增，再将细胞移入无生长素的发酵罐中诱导出大量胚状体。 胚状体同步化处理或分选：胚状体的同步化是指促使所有培养的细胞或发育中的细胞团块进入同一个分裂时期。只有同步化了细胞才可能成批地产出成熟胚胎。常用的方法有： 化学方法：饥饿法——将培养基中的一些重要成分反复去除和添加；阻断法——在培养初期加如DNA合成抑制剂，如5-氨基脲嘧啶，阻断细胞分裂的G1期。 物理方法：低温处理法、过滤筛选法、渗透压分离法、密度梯度离心法(体胚不同的发育阶段密度有差异)等到胚状体胎成熟以后，就可以进行人工种子的包埋了。其中过滤筛选法较实用、快速。 人工种子的包埋 人工种子的包埋关系到人工种子萌发、贮藏和生产应用等重要环节。Redenbaugh于1984年首次筛选出透水性好的海藻酸钠作为胚状体和不定芽的包埋剂。包埋方法主要有将胚状体或小植株悬浮在一种粘滞的流体胶中直接播入土壤的液胶包埋法；将体细胞胚经干燥后用聚氧乙烯等聚合物进行包埋的干燥包裹法；以及通过离子交换或温度突变形成凝胶包裹材料的水凝胶法，Redenbaugh等用此法包裹单个苜蓿体细胞胚制成了人工种子，离体成株率达86%。组合包埋法以及流体播种、液胶包埋、琼脂、铝胶囊等新颖包埋法也开始被应用，George等用硅胶包埋谷子体细胞胚，葫发率达82%，且4℃贮藏14天后仍能自行裂开、顺利萌发。 对胚状体包裹要求做到：首先，不影响胚状体萌发，并提供其萌发与成苗所需的养分和能量，即起到胚乳的作用；其次，使胚状体经得起生产、贮存、运输及种植过程中的碰撞，并利于播种，即起到种皮的保护作用；最后，针对植物种类和土壤等条件，满足对人工种子的特殊需要。 目前研究中的人工种子普遍采用水凝胶法，以海藻酸钙作为包埋剂，它具有对胚状体无毒害作用、价格低廉等优点。但由于海藻酸钙对水溶剂有很好的通透性，使得包埋其中的营养物质、激素、抗生素等(即人工胚乳成分) 容易渗透出来，造成营养泄露；另外，由于没有真正意义上的“人工种皮”的包裹保护，一些病原微生物容易侵入胚状体，对种子造成破坏，因而目前绝大多数人工种子都只能在无菌条件下才能达到较高萌发率。 人工胚乳的制作 为了满足包裹要求，要有针对性地在包裹剂中加入大量养分、无机盐、有机碳源、植物生长调节剂，以及抗菌素和有益菌类。选用无毒、透气和吸水性强的木薯淀粉与海藻酸钠(1/2MS培养基配制)混合制作的胚乳可改善单一海藻酸钠人工胚乳的透气性、吸水性和发芽率，人工胚乳中加入GA3有利于人工种子的发芽，加入CaCl2有利于向培养物供氧，提高人工种子发芽率和耐贮藏性，加扩活性炭可改善营养固定和缓释，提高人工种子在土壤中的成苗率。 人工种皮的制作 人工种皮既要求允许内外气体交换畅通，以保持胚状体的活力，又要能防止水分及营养成分的渗漏和起保护作用。一般采取双层种皮结构，内种皮通透性较高，外种皮硬，透性小，起保护作用。 现已筛选出海藻酸钠、明胶、果胶酸钠、琼脂、树胶等可作内种皮应用，某些纤维素衍生物与海藻酸钠制成复合改性的包埋基质可明显改善人工种皮的透气性，海藻酸钠中加入多糖、树胶等可减慢凝胶的脱水速度，提高干化体细胞胚的活力。 外层种皮可选用半疏水性聚合膜，以降低海藻酸钙的亲水性，对人工胚乳起固定作用。另外可在膜上添加毒性小的防腐剂或溶菌酶，以防止微生物的侵入。Ling-FongTay用壳聚糖作为外种皮制作的油菜人工种子萌发率达100%，但在有菌条件下萌发率仍不高。美国杜邦公司生产的由乙烯、乙酸和丙烯酸三种物质聚合的Elvax材料是目前认为较好的一种人工种皮材料。 人们仍在积极寻找其他的包埋方式和包埋材料，以完善现有人工种皮的制作技术。 人工种子的贮藏 贮藏是人工种子的主要难点之一，目前应用的有低温法、干燥法、抑制法、液体石蜡法等及上述方法的组合。干燥法和低温法组合是目前应用最多的，胡萝卜愈伤组织在15℃相对湿度25%的条件下存放一年仍可再生。大豆体胚干化到原体积的40%～50%后再吸水，萌发率仍达到31%。干化增强人工种子幼苗的活力，可能与其超氧化物酶和过氧化物酶的活性显著提高，从而减轻低温贮藏对体胚的伤害有关。通过电镜观察和电导值与脱氢酶的比较，发现干化有助于体胚贮藏期间细胞结构、膜系统的保持和酶活性的提高，使体胚具有更好的耐贮性。富含胡萝卜体胚的悬浮培养液包埋于水溶性塑料薄膜内，形成的胶囊26℃干化4天后再吸水萌发仍可获得植株，高浓度的蔗糖、脯氨酸和ABA预处理体胚能提高干化耐受性，这可能与ABA等抑制体胚过早萌发、促进干物质积累有关。近年，液氮冻存体胚及包裹体胚的报道也越较多。 防腐是人工种子贮藏和大面积田间应用的关键技术之一。Castillo制得的人工种子虽有较高的萌发率，但未能在有菌条件下成苗，其主要原因是人工种子易感染病菌而腐烂。在甘薯人工种皮中加400～500mg/L的先锋霉素、多菌灵、安苄青霉素或羟基苯酸丙酯，均有不同程度的抑菌作用，萌发率可提高4%～10%。 2. 人工种子技术存在的主要问题 尽管目前人工种子技术的实验室研究工作已取得较大进展，并且已在繁殖遗传工程植物、减数分裂不稳定植物、稀有及珍贵植物的过程中，显示出超常的优势。但从总体来看，目前的人工种子还远不能像天然种子那样方便、实用和稳定。主要障碍在于人工种子的质量和成本：(1)许多重要的植物目前还不能靠组织培养快速产生大量的、出苗整齐一致的、高质量的胚状体或不定芽；人工种子的质量达不到植物正常生长、运输和贮藏的要求；人工种子的制种和播种技术尚需进一步研究。(2)目前多数人工种子的成本仍然高于试管苗和天然种子。虽然一些研究机构已经建立起大规模自动化生产线，能够生产出高质量、大小一致、发育同步的人工种子，但是它的成本仍高于天然种子。以苜蓿为例，目前生产1粒人工种子所需成本是美分，而1粒天然苜蓿种子的成本是美分，二者相差40多倍。因此，人工种子要真正进入商业市场并与自然种子竞争，必须降低生产成本。由于人工种子是由组织培养产生的，需要一定时间才能很好地适应外界环境，因此人工种子在播种到长成自养植株之前的管理也非常重要，在推广之前必须经过农业试验，并对栽培技术及农艺性状进行研究。 由此可见，人工种子要想成为种植业的主导繁殖体，目前仍有相当的困难。 3. 人工种子在园林绿化及水土保持方面的应用前景 人工种子与试管苗相比，具有所用培养基量少、体积小、繁殖快、发芽成苗快、运输及保存方便的特点；人工种子技术适用于难以保存的种质资源、遗传性状不稳定或育性不佳的珍稀林木的繁殖；人工种子可以克服营养繁殖造成的病毒积累，可以快速繁殖脱毒苗。因此，人工种子在快速繁殖苗木和人工造林方面，具有很大的应用前景。现在，我国处于经济高速发展时期，需要有大量的优良苗木种子供应，而我国现有的林木种子供应远远不能满足社会需求。人工种子可以工厂化地提供绿化种子，解决种子供应量不足的矛盾。随着人工种子技术的不断成熟完善，必将给我国的园林绿化方式带来革命性的变化

苜蓿种子内生菌的分离开题报告一般分为以下几个部分：1. 研究背景：简单介绍内生菌的概念和苜蓿种子内生菌在实际生产中的应用价值。2. 研究目的：明确研究的目的以及该研究对相关领域的意义和贡献。3. 方法和步骤：介绍研究方法，如苜蓿种子捕捉和处理、内生菌分离和培养等。4. 结果和分析：列举所获得的主要实验结果和数据，并对结果进行分析和解释。5. 结论和建议：总结研究，提出对内生菌研究和实际应用的建议。6. 参考文献：列举研究过程中涉及到的相关文献资料。报告应该结构清晰，逻辑性强，同时注意语言简明易懂，尽可能避免冗长或模糊的描述。

苜蓿种子内生菌的分离开题报告应该包括以下内容：1.研究的背景和意义：介绍苜蓿种子和内生菌的相关背景和意义，包括苜蓿在农业生产中广泛应用以及内生菌的生态作用等。同时概述国内外对苜蓿种子内生菌的研究进展和不足之处，引出本研究的研究目的。2.研究目的：明确本研究的具体研究目的和需解决的问题，即分离、鉴定苜蓿种子内生菌的多样性和数量，并分析其生态功能及其与苜蓿生长发育的关系。3.研究方法：介绍本研究所采用的实验设计、样本采集、实验室操作等详细的研究方法和步骤，并阐述其科学、可靠和有效性。4.预期研究结果和意义：阐述分离、鉴定苜蓿种子内生菌的多样性和数量的预期结果，以及对苜蓿生长发育和生态作用的影响，同时指出研究的理论价值和实际意义。5.研究的进展和计划：对研究进展情况进行概括，并列出接下来的研究计划和工作安排，包括实验进度、数据分析、研究结果的检验与验证、论文的撰写和发表等。6.参考文献：引用在开题报告中涉及到的相关文献和资料。总之，苜蓿种子内生菌的分离开题报告应该全面、具体和条理清晰，让读者能够清晰地了解该研究的研究目的、方法和预期结果，并发现其中的科学价值和意义，有助于顺利进行后续的实验研究和论文撰写。

土壤耕作与施肥紫花苜蓿种子细小，幼芽细弱，顶土力差，整地必须精细，要求地面平整，土块细碎，无杂草，墒情好。紫花苜蓿根系发达，入土深，对播种地要深翻，才能使根部充分发育。紫花苜蓿生长年限长，年刈割利用次数多，从土壤中吸收的养分亦多。据报道，紫花苜蓿每亩每年吸收的养分，氮为千克，磷千克，钾千克。氮和磷比小麦多1～2倍，钾多3倍。用作播种紫花苜蓿的土地，要于上年前作收获后，即进行浅耕灭茬，再深翻，冬春季节作好耙耱、镇压蓄水保墒工作。水浇地要灌足冬水，播种前，再行浅耕或耙耘整地，结合深翻或播种前浅耕，每亩施有机肥1500～2500千克，过磷酸钙20～30千克为底肥。对土壤肥力低下的，播种时再施入硝酸铵等速效氮肥，促进幼苗生长。每次刈割后要进行追肥，每亩需过磷酸钙10～20千克或磷二氨4～6千克。二 播种1．种子。播种前要晒种2～3天，以打破休眠，提高发芽率和幼苗整齐度。种子田要播种国家或省级牧草种子标准规定的I级种子；用草地播种Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级种子均可。2．接种。在从未种过苜蓿的土地播种时，要接种苜蓿根瘤菌，每千克种子用5克菌剂，制成菌液洒在种子上，充分搅拌，随拌随播。无菌剂时，用老苜蓿地土壤与种子混合，比例最少为1:1。3．播种量每亩播种子公斤，用草地每公顷～15千克，干旱地、山坡地或高寒地区，播种量提高20～50%。4．播种期。因各地气候不同，可分为三种情况：春播。春季土地解冻后，与春播作物同时播种，春播苜蓿当年发育好产量高，种子田宜春播。夏播。干旱地区春季干旱，土壤墒情差时，可在夏季雨后抢墒播种。秋播。在中国北方地区，秋播不能迟于8月中旬，否则会降低幼苗越冬率。5．播种深度。视土壤墒情和质地而定，土干宜深，土湿则浅，较壤土宜深，重粘土则浅，一般1～厘米。6．播种方法。紫花苜蓿常用播种方法有条播、撒播和穴播三种；播种方式有单播，混播和保护播种（覆盖播种）三种。可据据具体情况选用。种子田要单播，穴播或宽行条播，行距50厘米，穴距50×70厘米或50×50厘米或50×60厘米，每穴留苗1～2株。收草地可条播也可撒播，可单播也可混播或保护播种。条播行距30厘米。撒播时要先浅耕后撒种，再耙耱。混播的可撒播也可条播，可同行条播，也可间行条播，保护播种的，要先条播或撒播保护作物，后撒播苜蓿种子，再耙耱。灌区和水肥条件好的地区可采用保护播种，保护作物有麦类，油菜或割制青干草的燕麦、草高粱、草谷子等，但要尽可能早的收获保护作物。在干旱地区进行保护播种时，不仅当年苜蓿产量不高，甚至影响到第二年的收获量，最好实行春季单播。混播，紫花苜蓿生长快，分蘖多，枝叶盛，产量高，再生性强，刈割次数多，混播中其他牧草难于相配合，故以单播为宜。但若要提高牧草营养价值、适口性和越冬率，也可采用混播。适宜混播的牧草有：鸡脚草、猫尾草、多年生黑麦草、鹅冠草、无芒雀麦等。混播比例，苜蓿占40%～50%为宜。 田间管理1．播种后，出苗前，如遇雨土壤板结，要及时除板结层，以利出苗。2．苗期生长十分缓慢，易受杂草危害，要中耕除草1～2次。3．播种当年，在生长季结束前，刈割利用一次，植株高度达不到利用程度时，要留苗过冬，冬季严禁放牧。4．二龄以上的苜蓿地，每年春季萌生前，清理田间留茬，并进行耕地保摘，秋季最后一次刈割和收种后，要松土追肥。每次刈割后也要耙地追肥，灌区结合灌水追肥，入冬时要灌足冬水。5．紫花苜蓿刈割留茬高度3～5厘米，但干旱和寒冷地区秋季最后一次刈割留茬高度应为7～8厘米，以保持根部养分和利于冬季积雪，对越冬和春季萌生有良好的作用。6. 秋季最后一次刈割应在生长季结束前20～30天结束，过迟不利于植株根部和根茎部营养物质积累。7. 种子田在开花期要借助人工授粉或利用蜜蜂授粉，以提高结实率。8．紫花苜蓿病虫害较多，常见病虫害有霜霉病、锈病、褐班病等，可用波尔多液，石流合剂，托布津等防治。虫害有蚜虫，浮尘子，盲蝽象，金龟子等。可用乐果，敌百虫等药防治。但以一经发现病虫害露头，即行刈割喂畜为宜。新枝绿。