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kiko小毒
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susyweswes

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酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,简写ELISA)

指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上,利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法;酶联免疫吸附测定(ELISA)为免疫学中的经典实验。

基本原理为:使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。

扩展资料

结果判断——

1、定性测定:

定性测定的结果判断是对受检标本中是否含有待测抗原或抗体作出"有"或"无"的简单回答,分别用"阳性"、"阴性"表示。"阳性"表示该标本在该测定系统中有反应。"阴性"则为无反应。

2、定量测定:

ELISA操作步骤复杂,影响反应因素较多,特别是固相载体的包被难达到各个体之间的一致,因此在定量测定中,每批测试均须用一系列不同浓度的参考标准品在相同的条件下制作标准曲线。

参考资料来源:百度百科-ELISA

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小妮子--Amy

ELISA 试剂盒方面可以咨询上海武昊公司,不知你是否知道样本中的含量,浓度如果在ELISA的检测范围之内没有问题的,你自己不会做也没事的,购买武昊公司的产品,他们可以帮你免费代做。

95 评论

evilevilevil

不是先后结合。你应该设立两组,即一组固相抗体加磷酸化抗原,然后另一组固相抗体加非磷酸化抗原。然后显色后对比两组的OD差异。加磷酸化抗体的组的OD当然高了。酶标抗体是抗你的磷酸化蛋白的抗体啊,这个是要你自制的。底物你用最普通的就行了,比如OPD、TMB等都行。 我建议你的酶标抗体用磷酸化抗体,而固化抗体最好不用磷酸化抗体,尤其是你的磷酸化蛋白只有1个磷酸化位点的时候。因为固相抗体和酶标抗体有可能去竞争结合磷酸化位点。

293 评论

火焰天堂

1. 你说的应该是sandwich elisa吧,这是双抗体夹心ELISA,是ELISA的其中一种,具体实验过程试剂盒上有明确的说明,按着说明做就可以,一般2~3小时吧。2. 要根据你要检测的目的蛋白的量选择试剂盒,不同的试剂盒的灵敏度是不同的,你要选择适合你用的,买试剂和的时候问问就可以。3. ELISA是非常成熟的检测方法了,你蛋白含量很低的话对试剂盒要求就比较高,最好用进口试剂盒,而且试剂盒的灵敏度一定要高,你预计你要检测蛋白的量要在试剂盒检测范围内,如果蛋白量太低,容易检测不出来,太高要稀释后再检测。祝实验顺利吧

104 评论

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