小夜公主
知道蛋白质分子量、氨基酸组成计算器一般的方法: SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量[原理] 十二烷基硫酸钠(Sodium dodecyl sulfate, 简称SDS)-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量,是六十年代末Weber和Osborn在Shapiro等人在实验基础上发展起来的一项新技术。用这种方法测定蛋白质的分子量具有快速灵便,设备简单等优点。 蛋白质的电泳迁移率在一般的电泳方法中,主要取决于它在某PH下所带的净电荷量、分子大小(即分子量)和形状的差异性,而SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳对大多数蛋白质,主要取决于它们的分子量,与原有的电荷量和形状无关。 SDS是一种阴离子表面活性剂,在一定的条件下,它能打开蛋白质氢键和疏水键,并按比例地结合到这些蛋白质分子上形成带负电荷的蛋白质-SDS复合物,每克蛋白质一般结合克SDS。SDS与蛋白质的定比结合使蛋白质-SDS复合物均带上相同的负电荷,其量远远超过蛋白质原有的电荷量,因而掩盖了蛋白质间原有的电荷差异。在水溶液中,蛋白质-SDS复合物具有相同的构象,近似雪茄烟形的长椭园棒(短轴均为,长轴则随蛋白质的分子量成正比变化),克服了蛋白质间原有的形状差异。这样蛋白质-SDS复合物在凝胶中的迁移率不再受原有电荷和形状的影响,而只是蛋白质分子量的函数。蛋白质分子量与电泳迁移率间的关系可用下式表示:lgMr = K – bm式中 Mr为分子量;K为常数;b为斜率;m为迁移率。 因此,用本法测定蛋白质的分子量只需根据待测蛋白质在已知分子量的标准蛋白质的lgMr~迁移率的图中的位置,就能得知分子量。用本法测得的分子量,除单链蛋白质外,均不是天然蛋白质的完整分子量,而是组成这些蛋白质的亚基或肽链的分子量。本法对一些电荷异常,或构象异常,或带有大辅基的蛋白质不适用,如组蛋白F1和某些糖蛋白等。对一些结构蛋白如胶原蛋白等也不适用。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳按照凝胶电泳系统中的缓冲液、pH值和凝胶孔径的差异可分为SDS-连续系统电泳和 SDS-不连续系统电泳两类;按照所制成的凝胶形状和电泳方式又可以分为SDS-聚丙烯酰胺凝胶垂直管型电泳和SDS-聚丙烯酰胺凝胶垂直板型电泳两类。本实验采用SDS-不连续垂直板型操作方法。通过实验使学生掌握SDS-聚丙烯酰胺凝胶垂直板式电泳的原理及技术,包括制胶、灌胶、加样、剥胶及固定染色等,学会用这些方法测定蛋白质分子量。[方法与步骤]一、加样液的制备 1、标准蛋白质加样液的制备 称取细胞色素,胰凝乳蛋白酶原,胃蛋白酶,卵白蛋白,牛血清白蛋白各~1mg,置小离心管(Eppendorf管)中,加入样品溶解液1mL,充分溶解,如有不溶物应离心除去。沸水浴热处理3min,冷却备用。2、待测蛋白质加样液的制备根据待测蛋白质样品存在的状况而定。(1)固体待测蛋白样品,如为无盐的纯蛋白质固体制剂,加样液的制备方法同标准蛋白质加样液的制备;如为含盐的纯蛋白质固体制剂,应先加水充分溶解,对透析缓冲液透析12~16h,然后吸取(蛋白浓度应为~1mg/mL),置Eppendorf管中,并加入等体积浓样品溶解液,沸水浴热处理3min,冷却备用。(2)液体待测蛋白样品,如为无盐的纯蛋白质液体制剂,则加入等体积浓样品溶解液,然后热处理;如为含盐的液体制剂,则需先透析。二、凝胶的制备1、凝胶板的准备(1)洗板将洗洁精用温水稀释后,用它浸透海绵擦洗玻板,然后用自来水洗净,再用酒精将板擦干。(2)安装制胶板制胶前将玻板与塑料嵌条和凹型陶瓷板的边缘对齐,下沿用密封胶带封口,用塑料夹子或铁夹子将两端夹好,注意要确保密封,安放在固定架上。2、分离胶和浓缩胶溶液的配制组 分 分离胶/mL 浓缩胶/mL 凝胶贮备液 分离胶缓冲液() — 浓缩胶缓冲液() — 10%SDS TEMED 双蒸水 10%过硫酸铵 总体积 2注意:①最后加入10%过硫酸铵溶液,混合制成凝胶液,迅速灌制凝胶。②丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺均为神经毒剂,对皮肤有刺激作用。因此必须小心操作,不得吸入和接触皮肤,聚合完全聚丙烯酰胺凝胶无毒。3、制分离胶将制胶板垂直放好,插上与相应厚度的样品梳,在梳子下缘线1cm处做标记,卸下样品梳。将配好的分离胶溶液缓慢加入制胶板之间,直至液面达到标记处。用滴管贴近胶液界面小心而又缓慢地覆盖厚度约的正丁醇层,以防止溶液蒸发并保证胶面平整。4、制浓缩胶分离胶聚合后,倒去正丁醇,用蒸馏水冲洗分离胶胶面两次,用滤纸吸去残液。用滴管将浓缩胶溶液加在分离胶面上,充满制胶板,插入样品梳。(三)电泳1、安装电泳槽浓缩胶聚合后,除去梳子、密封胶带以及六个铁夹。将制胶扳、电泳糟内芯、另一对制胶板依次放入槽内。两制胶板的凹型陶瓷板均应与电泳槽内芯接触。然后插入楔型板以固定两套制胶板。如果每次电泳只用一块胶板,必须用提供的有机玻璃板代替另一套制胶板。2、加样在内外水槽加注缓冲液,使内外槽的水位均超过凹形板的缺口但低于塑料板的上沿。用微量加样器在梳井内加样。3、电泳盖好上盖,在80V~100V的电压下电泳约3h,至溴酚蓝指示的电泳前沿到达制胶板的下缘止,关掉电源。然后拔掉楔形板,取下制胶扳。(四)染色、脱色用刀片或薄板将白塑料板与陶瓷板轻轻撬开,用刀片沿分离胶与浓缩胶的交接处,将分离胶切下,并在分离胶的左上角切掉一小角,以标记样品顺序。然后手戴橡胶手套将分离胶小心移入染色器皿中。在染色器皿中加入100mL考马氏亮蓝染液(含考马氏亮蓝R-250,30%乙醇,10%乙酸的水溶液),加盖,在摇床上染色2h。将染液倒回贮存瓶(可反复使用)。在染色皿中加入100mL脱色液(10%乙酸,30%乙醇),振荡脱色至蛋白条带清晰。[结果和计算]1、凝胶脱尽底色后,色带清晰显出。按实样描下或摄下电泳图谱。2、根据各蛋白迁移距离和染料迁移距离的比值,求出各蛋白的相对迁移率mr,然后作出lgMr~mr关系图,从图中找出未知蛋白mr对应的分子量。
海琦maggie
自制擦玻璃的清洁剂步骤:
1、首先准备一个容器,并且往里面倒入一点蜂蜜。
2、然后再往里面加入一大勺的小苏打。
3、接着往容器里加入半勺的食盐。
4、再之后往容器加入一些水并且搅拌一下,再将配置好的清洁剂倒入喷壶里就可以了。
5、最后将配置好的玻璃清洁剂喷一些在窗户玻璃上,
6、不用刷只需要用布擦一擦立马干净了。
定义
一、水基型清洗剂
1、由表面活性剂(如烷基苯磺酸钠、脂肪醇硫酸钠)和各种助剂(如三聚磷酸钠)、辅助剂配制成的,在洗涤物体表面上的污垢时,能降低水溶液的表面张力,提高去污效果的物质。按产品外观形态分为固体洗涤剂、液体洗涤剂。
2、固体洗涤剂产量最大,习惯上称洗衣粉,包括细粉状、颗粒状和空心颗粒状等。还有介于二者之间的膏状洗涤剂,也称洗衣膏。各类合成洗涤剂有不同的生产工艺,其中以固体洗涤剂最为复杂。世界各国普遍生产空心颗粒状固体洗涤剂,采用高塔喷雾干燥法,其主要工序有料浆制备、喷雾干燥、风送老化和包装。
3、液体洗涤剂制造简便,只需将表面活性剂、助剂和其他添加剂,以及经处理的水,送入混合机进行混合即可。
二、半水基型清洗剂
1、由细颗粒状弱碱性吸附各种助剂合成的药剂的新型清洗剂产品,采用天然介面活性磨粒为原料,配合多种活性剂及杀菌剂、抛光剂、进口参透剂以及独特光亮因子等环保技术高科技配制而成的,是一种多功能、高效的综合性环保清洗护理产品。是现代新型的去污产品,去污效果独特,用途广, 对人体皮肤没有副作用。
2、由活性磨粒为助与磨粒里含有独特的清洁药剂配合清洗时带有轻微软摩擦更能快速彻底清除各类严重的顽固污垢污染。灰垢、重油污垢、水泥垢、填缝剂垢、金属划痕、 锈垢、胶粘质、茶渍、饮品渍、胶锤印、皮鞋划痕、顽固蜡渍、 铝痕、木痕、方格痕、水印、鞋印、墨水印等污垢,环保,不损砖面,不伤手。
参考资料:百度百科--清洗剂 定义
幽香雨草
准备一个小喷壶,将白醋、洗洁精倒入进去,记住这两样多西不可倒太多,否则玻璃会更粘更难清洗,而且洗洁精会冒很多泡沫。接下来倒入少许白酒,还有适量的清水搅拌均匀即可,这样自制的擦玻璃清洁剂就制作好了。
贪吃的猫猫410
超级洗洁精母料(特别推荐)超级洗洁精母料+拉丝粉+香精+防腐剂+盐+水=洗洁精*超级洗洁精母料与常规洗洁精原料相比有四大不同:1、集超级除油去污、高发泡、高稠、透明为一体,最大优势就是除食用油能力超级强。2、能除常规洗洁精不能除的工业油、矿物油和无机油。3、与所有的配方相比,同样的成本,性价比最高。4、能抗金属离子对活性物的影响,5、推荐用于生产元至元一斤成本的洗洁精超级洗洁精母料,是成都恒丰宏业洗涤剂厂最新研发的专门生产洗洁精的一种超级母料,有下列特点:一、特别功能1,超级除食用油能力,对花生油、菜子油、色拉油、玉米油、牛油、羊油、猪油、茶子油、棕榈油、植物油、混合油等各种食用油有超强乳化和清洗能力。2、很强的去污能力,对污垢、污泥、污渍、污迹有超强的乳化、分散、瓦解、脱离能力。3、很强的乳化能力,对工业油、矿物油、无机油、有机油、食用油、动物油、植物油等混合的复合油脂,有很强的乳化能力。4、很好的增稠能力,用盐就能增稠,不需要添加其他增稠剂。5、非常好的发泡能力,瞬间发泡、二次发泡和增泡稳泡效果都非常好。6、超级洗洁精母料为100%活性物成份,没有无效成本的成份。7、非常透明,中性,耐硬水,抗金属离子对活性物的影响。二、生产配方比例参考(50公斤配比)1、生产元一斤成本:超级洗洁精母料3公斤+拉丝粉20克+香精、防腐剂、盐适量+水47公斤=50公斤洗洁精2、生产元一斤成本:超级洗洁精母料4公斤+拉丝粉20克+香精、防腐剂、盐适量+水46公斤=50公斤洗洁精3、生产元一斤成本:超级洗洁精母料公斤+拉丝粉20克+香精、防腐剂、盐适量+水45公斤=50公斤洗洁精4、生产元一斤成本:超级洗洁精母料公斤+拉丝粉20克+香精、防腐剂、盐适量+水44公斤=50公斤洗洁精5、生产元一斤成本:超级洗洁精母料公斤+拉丝粉20克+香精、防腐剂、盐适量+水43公斤=50公斤洗洁精6、生产元一斤成本:超级洗洁精母料公斤+拉丝粉20克+香精、防腐剂、盐适量+水42公斤=50公斤洗洁精7、其他成本的比例参考上面数据自己调整。三、生产流程1、生产流程:将超级洗洁精母料、拉丝粉、香精、防腐剂加入水中,用搅拌机搅拌溶解后加盐增稠就行了。2、如何调盐的比例1)、初定盐比例:先做一公斤产品小试,方法是:用手指捏(不要用勺子)一点点盐,一点点的少少放,放一次搅拌溶解后再放第二次。当稠度产生后,连续放三次盐都不能提高稠度就说明盐比例够了。使用的盐要先计量,确定一公斤产品用盐比例,然后放大到生产所需比例。参考比例:按水总重量的之间来调。2)、确定盐比例:从一公斤产品用盐比例放大到生产所需比例,会存在一定的计量误差,需要再次进行调整,调整方法:将生产的洗涤溶液打一公斤出来,加盐比例调整到最稠状态,就知道最终的盐比例是多少。3)、调整盐比例:更换盐品种(食用盐、工业盐、盐水、粗盐)、变化水重量、调整配方、调整成本、调整原料,涉及这几种情况之一,都要重新调整盐比例。注意事项:盐过多会变成水,水溶液变白。
小李飞刀xy
很多方法可以自制窗户清洗液。你可以选择一种最能满足你需要的自制产品,也可以放你家里的任何一款现成产品。总之,这些清洗液的制作配方是特别能达到光亮,无痕的擦窗效果。第一种配方:首先你将一夸脱的白醋,一杯柠檬氨或者普通的氨水,24安士的普通蓝色窗户清洁液,这些产品都可以从商店买回来。准备好后,你可以将这三种液体混合在一个一加仑附有盖子的空容器里面。倒完了,就用盖子盖好容器,然后摇动容器将三种液体充分混合。最后加入过滤水,直到离容器口一英寸为止,这样就完成了自制的窗户清洗液。用一个喷洒器装着这些液体,然后用它来清洁你的窗户。第二种配方:准备一个喷洒器,将一杯白醋和一杯过滤水倒进容器混合。这么简单的制法就可以帮你清洁家里的窗户,玻璃,镜子和其他家具的表面,比如说柜台和炉头。其中的原理其实是醋有去油,溶解肥皂沉淀物和水迹的作用。但是,世界上没有事情是完美的。千万不要用醋接触石头或大理石表面,因为醋会侵蚀这些物质的。第三种配方:同样准备一个喷洒器,将半杯氨水,半杯异丙醇外用酒精和半杯水倒入容器混合。这种清洗液可以用在窗户,玻璃,镜子,油布,炉头和柜台方面的清洁。但是,千万不要用它接触石头或大理石。
机械设计类论文题目1. 300×400数控激光切割机XY工作台部件及单片机控制设计 2. DTⅡ型固定式带式输送机的设计 3. FXS80双出风口笼形转子选粉机
时间过得真快,大学生活即将结束,毕业论文是毕业生都必须通过的,毕业论文是一种有准备、有计划、比较正规的、比较重要的检验大学学习成果的形式,毕业论文应该怎么写呢?
以下均可参考,满意给我加分,1. 基于FX2N-48MRPLC的交通灯控制 2. 西门子PLC控制的四层电梯毕业设计论文3. PLC电梯控制毕业论
1、首先,要研究中国人的头发类型。根据中国人的头发特点,选择合适的洗发水成分,以确保洗发水能有效清洁头发、保湿、滋润头发。2、其次,要研究中国人的头皮情况。根据
随着建筑行业的发展,施工过程中的机械化程度越来越高,对工程机械设备的各项性能指标诸如安全性、经济性等也提出了更高的要求。下面是我为大家整理的关于机械毕业论文,供