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HPLC法测定泻痢消胶囊中芍药苷的含量
本研究对制剂中的芍药苷进行了含量测定，为完善泻痢消胶囊质量控制提供一定参考。以下是文学网我为大家分享的关于HPLC法测定泻痢消胶囊中芍药苷的含量之论文范文。
摘要：目的 建立泻痢消胶囊中芍药苷的含量测定方法。方法 色谱柱：Kromasil C18柱( mm×250 mm，5 μm);流动相：甲醇磷酸溶液(25:75);检测波长：230 nm;流速： mL·min-1。结果 芍药苷在 4～ 0 μg(r= 9)范围内线性关系良好，回归方程分别为Y = 190 1X – 4 (r = 9)，平均加样回收率分别为(RSD=)。结论 所建立的方法准确可靠，重复性好，可用于泻痢消胶囊中芍药苷的质量控制。
关键词：泻痢消胶囊;芍药苷;HPLC
泻痢消胶囊是由酒黄连、酒白芍、槟榔、泽泻、甘草等十二味中药加工制备而成，具有清热燥湿，行气止痛之功效[1]，在临床上常用于大肠湿热所致的腹痛泄泻，大便不畅，下痢脓血等症，效果显著。原标准中只对制剂中的黄连小檗碱成分进行了含量测定，而白芍养血敛阴，缓急和里，为方中要药，目前认为芍药苷为白芍的.有效成分，因此，本研究对制剂中的芍药苷进行了含量测定，为完善泻痢消胶囊质量控制提供一定参考。
1 仪器与试药
仪器 Agilent1100高效液相色谱仪;UV1100型紫外分光光度计(上海天美科学仪器有限公司);KQ-250型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);AB135-S电子天平(瑞士梅特勒-托利多公司);
试药 芍药苷对照品(110736-200424)均购自中国药品生物制品检定所;泻痢消胶囊(云南白药集团股份有限公司)购自青岛国风药店;甲醇、磷酸为色谱纯，水为纯化水，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
色谱条件 色谱柱：Kromasil C18柱( mm×250 mm，5 μm);流动相：甲醇磷酸(25︰75);检测波长：230 nm;流速： mL·min-1。理论板数按芍药苷峰计算应不低于3 000。
溶液的配制
对照品溶液 取芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇溶解并制成每1 mL含120μg的溶液，即得。
供试品溶液 取本品内容物，研细，取约 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，称定重量，超声处理(功率300 W，频率50 kHz)30 分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10 mL，蒸干，残渣加水10ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次20ml，合并正丁醇液，水浴蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过、即得。
阴性对照溶液 取白芍以外的其余药味，制得不含白芍的空白制剂，照供试品溶液的制备方法制备，即得。
方法学考察
专属性试验 精密吸取上述对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液各10 μL，按项下色谱条件进行测定。结果供试品中芍药苷色谱峰能达到基线分离，且保留时间与相应对照品一致;阴性对照溶液在相同保留时间处无吸收峰，表明其余药味对芍药苷的测定无干扰，结果见图1。
线性关系考察 取芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含μg的溶液，精密量取2、4、6、8、10ml，分别置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，按照项下色谱条件进行测定。以芍药苷进样量为横坐标(X)，对应峰面积为纵坐标(Y)，绘制标准曲线，得回归方程为：Y = 190 1X – 4 ，r = 9。结果表明，芍药苷进样量分别在 4～ 0μg范围内线性关系良好。
精密度试验 精密吸取项下对照品溶液，按项下色谱条件进行测定，重复测定6次，进样量10 μL。结果芍药苷面积的RSD分别为(n=6)，表明仪器精密度良好。
稳定性试验 取上述供试品溶液分别于配制后的1、3、5、7、9、12 h测定芍药苷峰面积，进样量10 μL。结果芍药苷峰面积的RSD分别为(n=6)、，表明供试品溶液在12h内具有良好的稳定性。
重复性试验 取同一批次泻痢消胶囊(批号20101004)内容物，共6份，分别按项下方法制得供试品溶液，照项下色谱条件进行测定，进样量10 μL。结果制剂中芍药苷平均含量分别为 3 mg/g，RSD为(n=6)，表明本含量测定方法重现性较理想。
加样回收试验 取已知含量的泻痢消胶囊(批号20100401，芍药苷含量 3 mg/g)内容物，共6份，各约，精密称定，分别精密加入芍药苷对照品溶液( mg/mL)和甲醇各25 mL，称定重量，其余按项下方法操作，制得供试品溶液，照项下色谱条件进行测定，进样量10 μL，计算加样回收率。
样品含量测定 取3批样品按供试品溶液制备法制得供试品溶液，并按项下色谱条件进行测定，每批样品测定3份。
3 讨论
供试品制备方法选择 本研究对供试品制备方法进行了筛选，甲醇液直接超声处理，进样测定，杂质干扰严重，芍药苷色谱峰分离不理想，进而采用正丁醇萃取法进行除杂处理[2]，结果供试品溶液中中芍药苷色谱峰分离良好。
流动相的优选 本研究参考药典及相关文献[3，4]中关于芍药苷的含量测定方法，对流动相进行了筛选，最终选用甲醇-磷酸(25:75)系统，此系统能有效减小芍药苷拖尾，使色谱峰峰型良好，保留时间适中。
参考文献
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京，化学工业出版社，2010:851.
[2] 王晓燕，朱宝珠，李顺吉，等.RP-HPLC法测定逍遥丸中芍药苷的含量[J].中医研究，2008，21(5): 14-16.
[3] 唐富丽，秦郁文.HPLC测定逍遥合剂中芍药苷的含量[J].齐鲁药事，2011，4:633-635.
[4] 祝明，胡梅素，薛冬，等.高效液相色谱法测定妇宝颗粒中芍药甙的含量[J].中国药品标准;2001，2：112-114.
汉口小霸王
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