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小优雅0811
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哆啦爱梅

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米帅峰峰

内容主要有动植物基因工程、细胞工程的基础研究及生物技术在农业、医学、食品、环保方面的应用成果、新技术、新方法,以及有关的商品、产业化信息、政策、法规等。可供从事生物技术研究的科技人员、高校师生、主管部门管理人员及企业有关人士的跟踪参考。跨越世纪的1997-2007年,发表国际国内最早的转基因禽类输卵管生物反应器(oviduct bioreactor)和系统遗传学(以及遗传学发展三时期)概念、理论和原理的论文。《生物技术通报》系中国农业科学院农业信息研究所与生物技术研究所及中国农学会高新技术农业应用专业委员会共同主办的国家级综合性科技刊物。2008年入选全国中文核心期刊,2006年首批进入中国农业核心期刊。主要报道国内外农、牧、林、渔及医学、轻化等领域中生物技术研究的新进展、新技术、新成果与发展趋势,内容包括基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程、蛋白质工程以及生物工程的应用、新的实验技术与方法等。 顾问:卢良恕、李载平、王涛、范云六、丁勇、贾士荣主任:沈桂芳副主任:梅方权、黄大昉、章力建、安道昌、雷茂良、孟宪学、李思经委员(以姓氏笔划为序):王海波、邓子新、石燕泉、孙国凤、成卓敏、朱玉贤、朱祯、朱鑫泉、阮力、李秀兰、吴祥甫、何家禄、辛志勇、陈永福、周永春、张启发、郑康乐、赵琦、贾继增、郭三堆、唐纪良、童光志、曾邦哲、蔡幼民。主编:沈桂芳 一、栏目及其内容1.专家 论坛 专家对当前生物技术研究和应用中的大事、要事及热点问题提出看法和建议。2.综述与专论 论述生物技术领域某学科国内外前沿研究的最新进展及某重点课题的研究进展。3.技术与方法 新的或改进的实验技术、检测手段及方法。4.研究 报告 某项实验研究的试验材料、技术与方法、结果与讨论。5.成果与应用 介绍某项成果的开发与应用情况(含技术方法和经济效益)。可附上与文字配合的黑白照片2~3张;每篇1500~3000字。6.其 它 报道重要生物技术会议,国家颁布的有关政策、法令,重点实验室与公司介绍等。要求:每篇500~1000字。二、投稿要求及说明1.文章要求:(1)第一作者请注明姓名、出生年、性别、职称、职务、研究方向;(2)中英文题目要一致,每篇文章要有300字左右的中英文摘要和5~8个关键词;(3)附主要参考文献,每篇文章最好6000字左右。(4)表格请使用三线表格式,标注表题。(5)如需用图片说明,请提供黑白的清晰照片,并附上图题、图注。(6)针对“研究报告”类文章,试验结果除了以图、表的形式展示外,还需附以文字对重点内容加以描述、说明。此外,图表中的指示性数字、符号等所代表的具体内容要在图下加注解释(例如,琼脂糖凝胶电泳的条带M,1,2,3…..分别是哪种物质)。(7)作者在对某一专题、或是某一研究领域进行综述时,需要对收集的文献及其他相关资料进行归纳、整理,明晰文章论点,并对选题做系统、全面、深入的分析、论述。最后,在全面、深入地分析、评价现有研究的基础之上,对该研究领域未来的发展趋势进行科学、合理化预测,且提出严谨、有价值的建议。综述是本刊的重点栏目之一,作者在投综述类文章时,需要对专题的发展过程,或是前人研究历史做清晰、有条理的论述,避免大量文献的堆砌。此外,文中所引用的参考文献最好是近5年国内外公开发表的文章。2.一律用文后参考文献的形式,所引用的参考文献需按在文中出现的先后顺序编码,且与文后参考的序号相对应。3.参考文献著录格式如下:(1) 作者,书名.地址:出版社,出版时间,页码.例:刘良式,植物分子遗传学.北京:科学出版杜,1998,40~48.(2) 作者,作者,等.文章题目.刊名,年,卷(期):页码.例1: 朱立煌,徐吉臣,陈英,等.用分子标记定位一个未知的抗稻瘟病基因.中国科学(B辑),1994, 24:1408~1502.4.请勿一稿多投,稿件文责自负,1个月后如未收到录用通知可投他刊。5.邮寄打印稿1份并同时发送电子稿。

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zenghuo721

《Nature》杂志用全球观点观察事物的优良传统

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角落小泰迪

做小鼠胚胎发育的研究人员一般喜欢用LacZ,也就是将LacZ置于一个启动子的调节之下。用LacZ可以进行胚胎全身染色(whole body staining),这样可以了解一个基因在体内的表达谱全貌。如果做细胞跟踪,比如免疫细胞,神经细胞等,一般喜欢用荧光蛋白。这样一是容易对细胞进行分离(比如FACS)和体外分析,二是容易对分离的细胞进行体内追踪(比如Adoptive transfer)。早些年用的最多的是EGFP和EYFP。有的时候,我们需要将两种不同的reporter小鼠交配在一起,研究两个基因的关系,这时可以将两个基因采用不同的荧光蛋白进行标记,也就是做两种不同的模式小鼠。因为早期大家多是用EGFP,现在可以多做一些其它荧光蛋白的报告基因小鼠,以便跟以前研发的EGFP小鼠结合起来研究。 zsGreen和EGFP, EYFP都是绿色荧光。EGFP和EYFP很难区分开。zsGreen是一个比较稳定的绿色荧光蛋白。DsRed和TdTomato都是红色荧光。这两种荧光蛋白都有报告基因模式小鼠发表。TdTomato是一个信号非常强的荧光蛋白,目前已经有报告基因小鼠发表,对细胞/小鼠也没有明显的毒性。相信以后会有越来越多的小鼠用TdTomato来做报告基因。虽然mRFP和mCherry是两个非常好的荧光蛋白,但由于它们需要584nm的激发光,所以一般的FACS仪器不能检测到信号,需要用到LSRII这样的仪器,而很多实验室可能没有这样的仪器。也有用EBFP, ECFP做细胞实验的,但用到小鼠上的比较少。比如需要用到紫外光来激发。如果想在一个小鼠里表达两种荧光蛋白,最好是用两种分得比较开的,比如,最好不要同时用EGFP和EYFP。 HuCD2和Thy1.1是细胞表面受体。HuCD2因为去掉了C-term序列,使得其失去了信号传导的功能。那什么时候会用这两种分子呢?比如我们想研究一个细胞内蛋白基因(比如转录因子)的功能,经常需要把表达这个蛋白的细胞分离纯化出来。这个时候可以将HuCD2或Thy1.1报告基因放置在这个细胞内蛋白基因启动子下(比如加一个IRES-Thy1.1), 这样所有表达这个细胞内蛋白的细胞都会在细胞表面表达Thy1.1。这样就可以用anti-Thy1.1抗体将这一群细胞分离出来,进行后续研究。当然也可以用anti-Thy1.1抗体进行组织切片的免疫荧光检测。 HA、FLAG、Biotin等是细胞和生化实验中常用的标签多肽或蛋白。在Western blot,免疫沉淀(Immunoprecipitation)等实验中经常用到,因为有非常特异的HA、Flag抗体。Biotin可以跟生物素(Streptavidin)直接结合并用于免疫沉淀。在模式小鼠中,这些标签多肽或蛋白可以与要研究的蛋白做成融合蛋白。这种模式小鼠最常被用到的是Chip-chip实验。比如要研究一个转录因子的功能,就需要知道这个转录因子在细胞内(正常或刺激条件下)结合到染色体基因组DNA的位置以及结合序列。我们知道,特异性好、亲和力高的抗转录因子的抗体非常不容易得到或制备。这个时候可以将标签多肽(比如FLAG)放在转录因子的C-term,做成融合蛋白。刺激细胞之后,对细胞进行化学交联,并破碎细胞以及基因组DNA,然后用anti-FLAG抗体作免疫沉淀,将转录因子沉淀下来。最后分析这些转录因子所结合的DNA片段序列,从而找到该转录因子的在基因组上的识别序列,也就找到了该转录因子的作用基因。 荧光素酶做报告基因模式小鼠,一般是为了做活体成像实验。比如在一个细胞因子启动子下面放置荧光素酶基因。免疫小鼠之后,有些细胞或器官表达该细胞因子同时表达荧光素酶。通过注射荧光素酶底物可以检测荧光在小鼠体内的分布,从而得出该细胞因子在不同免疫条件下的表达情况。荧光素酶在癌症研究中也经常用。通过荧光活体成像可以研究肿瘤细胞的发生和转移。 报告基因很多。这里只是一点简要的介绍。不同的模式小鼠根据实验目的不同,可以做非常不同的设计。

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